霉菌试验的工作流程修订原件2霉菌试验技术手册.doc

霉菌试验工作流程 二零零零年四月二十五日 二零零二年十一月 待修改 目 录 一、试验前的准备 灭菌方法（附录A） 选择菌种 制备培养基 倒平板 菌种的移植、培养及保藏 无机盐溶液、浸渍（营养）液的制备方法 试验设备准备 试验场所及用具的灭菌 试验所需用具 对照样品的准备 试验样品的准备 安装试验样品及对照样品 预处理 二、制备混合孢子悬浮液 三、试验 四、样品出箱及最终检测 五、出具试验报告及资料归档 六、附录A 灭菌方法（包含整个霉菌试验过程中的灭菌方法） 试验准备 选择菌种 1.1 菌种来源 菌种来源必须是经国家认可的菌种保藏和研究机构提供的纯正菌种。 1.2 试验菌种 按照试验标准有关条款规定的菌种名称和菌号准备菌种（各行业标准要求试验菌种名称和菌号见表1、各种菌种受影响的材料见表2）。 1.3 菌种检查 在菌种移植前，对试验用菌种进行纯度检查，如有不纯或变异的菌种应及时更换。菌种留试验备用及菌种贮存。 2、 制备培养基 霉菌试验中常用的培养基有：查氏培养基（Ca）、马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）。菌种保存时查氏培养基或马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）应交替使用,防止菌种退化。 2.1 查氏培养基 主要成份 硝酸钠（NANO3） 3.0g 磷酸氢二钾（K2HPO4） 1.0g 氯化钾（KCL） 0.5g 硫酸镁（MgSO4?7H2O） 0.5g 硫酸亚铁（FeSO4?7H2O） 0.01g 蔗糖 30g 琼脂 （15～20）g 蒸馏水 1000ml PH 6.8 表1 各行业标准要求试验菌种名称和菌号 标准代号 菌种名称 菌种编号 备注 GJB150.10-86 HB5830.13-86 黑曲霉 Aspergillus niger 3.3928 黄曲霉 Aspergillus flavus 3.3950 杂色曲霉 Asprygillus versicolor 3.3885 绳状青 Penicillum funiculosum 3.3875,3.3872 球毛壳霉 Chaetomium globosum 3.4254 GJB.150.10A-200X (未实施) 黑曲霉 Aspergillus niger AS 3.3928 两组选择一组，或根据需要附加菌种。 土曲霉 Aspergillus terreus AS 3.3935 宛氏拟青霉 Paecilomyces varioti AS 3.4253 绳状青霉 Penicillum funiculosum AS3.3875 AS3.3872 赭绿青霉 Penicillumochrochloron AS3.4302 短柄帚霉 Scopulariopsis brevicaulis AS 3.3985 绿色木霉 Trichoderma viride AS 3.3942 黄曲霉 Aspergillus flavus 3.3950 杂色曲霉 Asprygillus versicolor 3.3885 绳状青霉 Penicillum funiculosum 3.3875,3.3872 球毛壳霉 Chaetomium globosum 3.4254 黑曲霉 Aspergillus niger AS 3.3928 GB/T2423.16-99 黑曲霉 Aspergillus niger AS 3.3928 土曲霉 Aspergillus terreus AS 3.3935 出芽短梗霉 Aureobasidium pullulans AS 3.3984 宛氏拟青霉 Paecilomyces varioti AS 3.4253 绳状青霉 Penicillum funiculosum AS3.3875 AS3.3872 赭色青霉 Penicillium ochrochloron AS 3.4302 光孢短柄帚霉 Scopulariopsis brevicaulis AS3.3985 绿色木霉 Trichoderma viride AS 3.3942 GJB4