专题一基因工程的基本操作程序.ppt

2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： 目的基因表达载体提纯 取卵（受精卵） 显微注射 受精卵 新性状动物 2.微生物作受体细胞原因： 3、将目的基因导入微生物细胞 3.转化方法： 大肠杆菌 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少 处理细胞→ 细胞→表达载体与感受态细胞混合→ _________细胞吸收DNA分子。 Ca2+ 感受态 感受态 1.常用菌： 第三步:将目的基因导入受体细胞 生物种类 植物 动物 微生物 常用方法 受体细胞 农杆菌转化法 显微注射法 Ca2+处理法 体细胞 受精卵 原核细胞 第四步:目的基因的检测与鉴定 外源基因 受体细胞染色体 mRNA 蛋白质 性状 检测：导入？ 检测：转录？ 检测：翻译？ 鉴定：表现？ DNA分子杂交 分子杂交 抗原抗体杂交 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 IMN 1.检测 1）检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 方法——DNA分子杂交技术 基因探针：放射性同位素等标记的DNA分子 15N 15N 14N 14N 探针 转基因生 物的DNA 变性 变性 复性 IMN 1.检测 2）检测目的基因是否转录出了mRNA 方法——分子杂交技术 15N 15N 14N 探针 转基因生物 的mRNA 变性 2、鉴定（个体生物学水平） 3）检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 方法: 抗原--抗体杂交 若不能表达，要对抗虫基因再进行修饰。 　　例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定： 练一练 1：由同一种限制性内切酶切割成的黏性末端是 ①TCG ②AATTCGA AGCTTAA GCT ③CA ④ AGCTTC ⑤ AATTGA GTTCCA AG ACT A、①② B、①③ C、①④ D、②③ E、①⑤ 2.细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的主要作用是 A．提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B．有利于对目的基因是否导入进行检测 C．增加质粒分子的分子量 D．便于与外源基因连接 3. 有关基因工程的叙述正确的是 A．限制酶只在获得目的基因时才用 B．重组质粒的形成是在细胞内完成的 C．质粒都可作为运载体 D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4.哪项不是基因表达载体的组成部分( ) A.启动子 B.终止密码 C.标记基因 D.目的基因 5.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法( ) A．基因枪法 B．显微注射法 C.农杆菌转化法 D．花粉管通道法 胰岛素是治疗糖尿病的特效药，长期以来只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。 假如让你用基因工程的方法使大肠杆菌生产出人的胰岛素，想一想，如何设计？ 尝试设计 植物基因工程硕果累累 动物基因工程前景广阔 基因工程药物异军突起 基因治疗曙光初照 基因工程的应用 1.植物基因工程硕果累累 1）抗虫转基因植物 2）抗病转基因植物 3）抗逆转基因植物 4）改良植物品质 2.动物基因工程前景广阔 1）提高动物生长速度 2）改善畜产品质量 3）生产药物:乳腺生物反应器 4）用转基因动物作器官移植的供体: 导入调节因子,抑制抗原决定基因的表达 在传统的药品生产中，药品直接从生物的组织、细胞或血液中提取 传统生产方法的缺点原料限制价格昂贵 利用基因工程方法制造“工程菌”，可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品：干扰素、胰岛素、白细胞介素2、乙肝疫苗、人生长激素等 。 3.基因工程药物异军突起 4.基因治疗 1）基因治疗的种类