从而引起质壁分离当提高细胞外溶液的水势.ppt

* 14.植物细胞死活的鉴定和植物组织渗透势的测定 ------质壁分离法 Part I 植物细胞死活的鉴定 实验原理 植物细胞是一个渗透系统。当细胞处于比其水势低的高渗透溶液中时，细胞由于失水而使原生质体体积缩小，从而引起质壁分离。当提高细胞外溶液的水势，使其大于细胞内的水势时，细胞重新吸水，原生质体体积膨胀，可见质壁分离复原。 活细胞与死细胞的膜在性质上有许多差别，特别是透性的变化最为明显；因此活细胞在高渗溶液中能产生质壁分离，而死细胞不能产生质壁分离现象，即可以此鉴定。 实验目的 利用质壁分离现象验证植物细胞的死活. 实验器材和试剂 植物材料:洋葱鳞茎 实验器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、刀片、酒精灯、滤纸、滴管、移液管、小培养皿 实验试剂:1mol/L蔗糖溶液 实验步骤 1取洋葱鳞片内表皮一小块，放在有1-2滴蒸馏水的载玻片上，盖上盖玻片并在显微镜下观察其自然状态，并绘图示细胞状态。 2在盖玻片的一边加上2-3滴1mol/L的蔗糖溶液，同时在对边用滤纸片吸去水分，使植物材料换入蔗糖溶液中。在显微镜下连续观察细胞有何变化，并绘图示细胞状态。 3观察后，即可从载玻片的一边小心加蒸馏水数滴，同时用滤纸缓慢的从另一边吸蔗糖溶液，反复进行数次以洗去蔗糖溶液，将材料又换入蒸馏水中。在显微镜下观察细胞又有何变化？并解释其原因。 4另取洋葱鳞片内表皮一小块，放在已加有数滴蒸馏水的载玻片上。现在酒精灯火焰上小心加热2-3分钟把植物细胞杀死。待冷却后于载玻片上加2-3滴1mol/L蔗糖溶液，盖上盖玻片进行镜检，看是否发生质壁分离。 Part II 植物组织渗透势的测定 实验原理 在一系列预先准备好的试液中寻找能引起生活组织里约一半的细胞发生质壁分离的溶液。即把一组同一目的的样品放置在一系列按照渗透势逐渐减低排列的蔗糖溶液里，并浸泡30分钟，然后转移到放有1-2滴同一浓度溶液的载玻片上，观察质壁分离发生的情况。镜检约50个细胞。若发生质壁分离，计算初始质壁分离细胞占镜检细胞数的百分比；若达50%，则细胞液的渗透势等于该浓度溶液的渗透势。或确定刚刚引起初始质壁分离和其相邻的尚不能引起质壁分离时溶液浓度的平均值，作为等渗浓度，代入公式ψs=iCRT中计算出植物组织渗透势。 实验目的 利用质壁分离现象测定植物组织的渗透势. 实验器材和试剂 同上(Part I) 实验步骤 1.在测定组织渗透势前先用1mol/L蔗糖溶液依C1V1=C2V2公式配制0.1、0.2 、0.3 、0.4 、0.5 、0.6 、0.7 、0.8 mol/L的蔗糖溶液各10毫升，放入小培养皿中；加盖，使溶液不致蒸发而改变糖液的浓度。 2.从年龄及部位相同的植物组织上用镊子撕取表皮若干小块。把组织薄片迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中；使其完全浸没，不要浮在上面。从高浓度溶液开始依次每隔3分钟依次投入每一种蔗糖溶液浓度后（使每一浓度中有2-3小块组织薄片），以便既有充分时间观察又能使组织薄片在不同处理中时间一致。 实验步骤 3.组织薄片在相应溶液中经过约30分钟后，从高浓度开始取出表皮放在载玻片上，并用滴管加相应浓度的蔗糖溶液1-2滴，盖上盖玻片，在显微镜下观察质壁分离情况。每次镜检数目50个左右。记录质壁分离的相对程度和液温。 如果在某浓度溶液中的组织薄片，其中有50%左右细胞发生初始质壁分离（即原生质体刚从细胞壁的角上分离），则该溶液的渗透势就等于该组织细胞液的平均渗透势。或确定刚刚引起初始质壁分离和其相邻的尚不能引起质壁分离时溶液浓度的平均值，作为等渗浓度。 4.测出等渗溶液后，用下列公式计算出胞液的渗透势： ψs=iCRT 作业 Part I 绘制质壁分离前和质壁分离后洋葱细胞图。试分析细胞质壁分离现象产生的条件及原因。 Part II 测定细胞液渗透势。 思考题 ?试述细胞渗透作用的原理。 ?用上述方法测得的数值与细胞液实际渗透数值是否完全相等？为什么？ ?如果用NaCl溶液测定所得的等渗溶液浓度是否与用蔗糖溶液所得的等渗溶液浓度相同？为什么？ * * *