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第六章 色谱法 基本要求 1．了解色谱法的分类及特点。 2．掌握薄层色谱法的基本原理，理解比移值Rf、的含义和展开剂的选择要求。 3．结合色谱流出曲线理解保留值、相对保留值、死体积、色谱峰区域宽度、标准偏差、峰底宽度等基本概念。理解分配系数、分配比的含义。 4．理解塔板理论，掌握柱效能指标 n有效、H有效的计算。 5．理解范氏方程中各项的物理意义及各项的影响因素。 6．掌握分离度R的含义及分离度的有关计算。 7．掌握气液色谱固定相的选择原则，能根据固定相与组分分子之间的作用力决定组分出峰的顺序。 8．理解热导池检测器和氢火焰离子化检测器的工作原理。理解检测器的性能指标灵敏度和检测限的含义。 9．掌握气相色谱定量分析方法（归一化法和内标法）以及各自的特点。 10理解高效液相色谱法的基本原理及特点，掌握正相色谱法和反相色谱法的含义。 11.了解气相色谱仪、高效液相色谱仪的组成及各部分的作用。 13.了解色谱法的分类及特点。 主要计算公式： 1．分配系数K K= 2．分配比 k= 3．分配系数比 4．分配系数与分配比之间的关系 5．分配系数或分配比与相对保留值之间的关系 6．理论塔板数 n==5.54()2 =16()2 7．有效理论塔板数 neff=5.54()2 =16()2 8．分离度 定义式 = 近似式 9.灵敏度 浓度型检测器 SC＝AC1C2C3／W 质量型检测器 Sm＝AC1C2·60／W 10．检测限 质量型检测器： Dm＝2N／Sm 浓度型检测器： Dc＝2N／Sc 11．色谱峰面积 对称峰 A=1.064(h(W1/2 不对称峰 A=h 12．定量计算 归一化法 内标法 外标一点法 内标对比法 典型例题解析 例1．在1m长的填充色谱柱上，某镇静药物A及其异构体B的保留时间分别为5.80min和6.60min,峰底宽度分别为0.78min及0.82min,空气通过色谱柱需1.10min。计算 （1）组分B的分配比 （2）A及B的分离度 （3）该色谱柱的平均有效理论塔板数和塔板高度 （4）分离度为1.5时,所需的柱长 解：（1） （2） （3） （4） = 例2．采用内标法分析燕麦敌1号试样中燕麦敌的含量时，以正十八烷为内标，称取 燕麦敌试样8.12 g,加入正十八烷1.88g,经色谱分析测得峰面积, 。已知燕麦敌以正十八烷为标准的定量校正因子,计算试样中燕麦敌的百分含量。 解：此法为内标法 例3．采用氢火焰离子化检测器对C8芳烃异构体样品进行气相色谱分析时，所得实验数据如下： 组份 乙苯 对二甲苯 间二甲苯 邻二甲苯 A/mm2 120 75 140 105 0.97 1.00 0.96 0.98 计算各组份的百分含量。 解： 此题为归一化法 乙苯%= 对二甲苯%= 间二甲苯%= 邻二甲苯%= 例4．用气相色谱法分离正戊烷和丙酮，得到色谱数据如下：正戊烷和丙酮的保留时间分别为25.35min和23.65min，空气峰的保留时间为45s，计算： （1）所用填充色谱柱的