植物组织培养技术在农业中的应用概要.ppt

③培养基成分 浓度过高的无机盐会使某些观赏植物的褐变程度增加，此外，细胞分裂素的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而使褐变现象加深。 ④培养条件不当 如果光照过强、温度过高、培养时间过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速被培养的外植体的褐变程度 2、减轻褐变现象发生的方法 ①选择合适的外植体 一般来说，最好选择生长处于旺盛的外植体，这样可以使褐变现象明显减轻。 ②合适的培养条件 无机盐成分、植物生长物质水平、适宜温度、及时继代培养均可以减轻材料的褐变现象。 ③使用抗氧化剂 在培养基中，使用半胱氨酸、抗坏血酸、PVP等抗氧化剂能够较为有效地避免或减轻很多外植体的褐变现象。另外，使用0.1%-0.5%的活性炭对防止褐变也有较为明显的效果。 ④连续转移 对容易褐变的材料可间隔12~24h的培养后，再转移到新的培养基上，这样经过连续处理7-l0d后，褐变现象便会得到控制或大为减轻。 五、培养物玻璃化现象 当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水渍状，这种现象通常称为玻璃化。 1. 玻璃化表现 玻璃化为试管苗的生理失调症。表现为： 试管苗生长缓慢，玻璃化的试管苗不易诱导生根。 茎、叶表面无蜡质，体内的极性化合物水平较高，细胞持水力差，植株蒸腾作用强。 玻璃化试管苗繁殖系数有所下降，无法进行正常移栽。 不同种类和不同品种间，试管苗的玻璃化程度也有所差异。 2. 玻璃化发生的可能原因 1）培养基上细胞分裂素水平较高 解决措施：在培养基中添加少量聚乙烯醇、脱落酸等物质，能够在一定程度上减轻玻璃化的现象发生。 2）培养容器中空气湿度过高，透气性较差 3. 解决的方法 ①增加培养基中的溶质水平，以降低培养基的水势； ②减少培养基中含氮化合物的用量； ③增加光照； ④增加容器通风，最好进行CO2施肥，这对减轻试管苗玻璃化的现象有明显的作用； ⑤降低培养温度，进行变温培养，有助于减轻试管苗玻璃化的现象发生； ⑥降低培养基中细胞分裂素含量，可以考虑加入适量脱落酸。 * 马铃薯脱毒试管苗 马铃薯人工种子 魔芋试管苗 （三）诱导生根方法 ①将新梢基部浸入50或100×10-6（ppm）IBA溶液中处理4－8h； ②在含有生长素的培养基中培养4-6d； ③直接移入含有生长素的生根培养基中。 上述三种方法均能诱导新梢生根，但前二种方法对新生根的生长发育则更为有利。而第三种对幼根的生长有抑制作用。其原因是当根原基形成后较高浓度生长素的继续存在，则不利于幼根的生长发育。 另外也可采用下列方法就可生根： ①延长在增殖培养基中的培养时间； ②有意降低一些增殖系数，减少细胞分裂素的用量(即将增殖与生根合并为一步)； ③切割粗壮的嫩枝在营养钵中直接生根，此方法则没有生根阶段。可以省去一次培养基制作，切割下的插穗可用生长素溶液浸蘸处理，但这种方法只适于一些容易生根的作物。 另外少数植物生根比较困难时，则需要在培养基中放置滤纸桥，使其略高于液面，靠滤纸的吸水性供应水和营养，从而诱发生根。 从胚状体发育成的小苗，常常有原先已分化的根，这种根可以不经诱导生根阶段而生长。 因经胚状体途径发育的苗数特别多，并且个体较小，所以也常需要一个低浓度或没有植物激素的培养基培养的阶段，以便壮苗生根。 （四）试管苗驯化 “温室的花朵不经风霜”，试管苗更弱，不能直接移栽，必须经过锻炼驯化 。 首先试管盖打开少许，逐渐全部打开，因为试管内湿度大。 试管内驯化4－7天后移栽。 通常不同植物的适宜驯化温度不同。 如菊花，以18～20℃为宜。 植物生长的温度过高，不但增强蒸腾作用，而且还易滋生杂菌。 温度过低使幼苗生长迟缓，或不易成活。 （五）试管苗移栽及其管理 1.移栽基质 移栽基质可以是蛭石、草炭土、珍珠岩等，或者以一定的比例混合使用。如蛭石：草炭土＝1：1比例。在移栽前，应将基质灭菌。移栽后保持湿度。成活后再移栽于土壤。 从试管中取出发根的小苗，用自来水洗掉根部粘着的培养基，要全部除去，以防残留培养基滋生杂菌。 要轻轻除去，应避免造成伤根。 栽植时用一个筷子粗的竹签在基质中插一小孔，然后将小苗插入，注意幼苗较嫩，防止弄伤，栽后把苗周围基质压实，栽前基质要浇透水。 栽后轻浇薄水。再将苗移入高湿度的环境中。 保证空气湿度达90%以上。 2. 移栽方法 3. 移栽后管理 (1)保持小苗的水分供需平衡 在移栽后5-7d内，应给予较高的空气湿度条件，使叶面的水分蒸发减少，尽量接近培养瓶的条件，让小苗始终保持挺拔的状态。 方法： 首先基质要浇透水，所放置的床面也要浇湿，搭设小拱棚，以减少水分的蒸发，并且初期要常喷雾处理，保持拱棚薄膜上有水珠出现。当5—7d后，发