(植物生理学实验)根系活力的测定(TTC法).ppt

根系活力的测定(TTC法) 一、实验目的 理解植物根系活力的内涵 掌握TTC法测根系活力的原理与方法 二、实验原理 三、实验材料 水培或砂培小麦、玉米等植物根系。 四、实验步骤—制作TTC标准曲线 四、实验步骤—测定根系活力 五、实验结果 六、思考题 1.植物的根系活力与地上部分的关系? 2.本实验中为什么要用磷酸缓冲液和37℃处理？ 3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位？为什么？ 4.本实验的根系活力指标的实质是什么？ 5.对TTC的特性及显色反应原理要清楚。 环境因素对光合作用的影响 实验目的 观察体验光照强度、温度和二氧化碳浓度对光合作用强度（速率）的影响。 实验原理 植物光合作用强度受光强、二氧化碳浓度、温度等环境条件的影响； 以植物叶片为材料时利用减压渗入法排除细胞间隙空气，充以水分，可使叶片沉于水中； 光合作用放出氧气，O2在水中溶解度很小，而在细胞间和叶表面积累，结果使原来下沉的叶片上浮，根据上浮时间长短即能比较光合作用强弱。 实验材料和试剂 材料: 小白菜健壮、叶龄相同的新鲜成熟叶片 无CO2水：冷开水（少CO2） 饱和CO2水：0.5% NaHCO3水 实验步骤 1.选取健壮、叶龄相同的新鲜成熟叶片,用直径为1cm的打孔器(避开叶脉)打下小圆片50片。 置于注射器中,加水减压，至圆片全部下沉为止,在烧杯中用水进行检查，选下沉叶圆片放在暗处备用。？ 2.取4只锥形瓶编号,其中1号加40ml冷开水,2、3、4号加入40mlNaHCO3水。各放入10个叶圆片（快速！）。按如下处理： 实验结果 结果记录： 4号瓶中小圆片全部上浮时（约5-8min)，统计其它各处理小圆片上浮数量， 或某一定时间内各处理上浮的小圆片个数。 结论与分析 * * 植物生理生化教研室 2013.03.27 H2O 无机盐 提供合成所需能量; 合成氨基酸和植物激素（ABA、CTK、GA等） 根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长 测定根系活力，为植物生长状况、营养供应研究提供依据。 氯化三苯基四氮唑（TTC）的标准氧化电位为80mV的氧化还原物质，获得H的能力强。溶于水为无色溶液，还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲腙 （TTF）。 生成的TTF比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，可用分光光度法定量测定。 — TTC TTF 根系活力 脱氢酶活性 丙二酸 碘乙酸 琥珀酸 延胡索酸 苹果酸 促进 抑制 （无色，溶于水） （红色，不溶于水） 吸取不同量的 TTC加入10mL容量瓶 Na2S2O4 TTC全部还原 乙酸乙酯 乙酸乙酯定容 0.25mL 0.50mL 1.00mL 1.50mL 2.00mL TTC含量（μg） 25 50 100 150 200 乙酸乙酯作参比，测定485nm下光密度值，绘制标准曲线 0.2-0.3g根尖样品(2-3cm长) 0.4％TTC、磷酸缓冲液各5ml 根充分浸没于溶液中 37℃下暗保温40-60min 加入1mol/L硫酸2ml 取出根吸干水分 与3～4ml乙酸乙酯在研钵内磨碎 红色提取液移入试管且用乙酸乙酯定容到10ml 空白试验作参比测485nm下吸光度 空白实验：根样品先加硫酸，其他操作相同。 查标准曲线，TTC还原量(mg) ＝ TTC还原能力 （mg/g(根鲜重)/h） 四氮唑还原量（mg） [根重（g）×时间(h)] 植物生理生化教研室 曾汉来 2012.03.12 实验原理 多种酶参与 上表皮 下表皮 植物本身：光合器官发育状况、发育时期 外因： 光照强度、光质等 CO2浓度 温度 水 影响光合作用的因素 矿质元素 病虫、污染等 制备二氧化碳饱和水还可以这样作： 减压 减压取理效果 灯光下 + 室温 强 4 灯光下冰盘中 + 低温 强 3 室内避光 + 室温 弱 2 灯光下 - 室温 强 1 放置位置 二氧化碳 温度 光照 瓶号 小圆片开始上浮