(植物生理学实验)植物细胞的观测和植物组织水势的测定.ppt

请按照学号就坐!  【实验原理】 中性红是常用的活体染料之一。 酸性，阳离子呈红色； pH7.0 以上，分子态溶解于水呈橙黄色。 中性红:变色范围在pH6.4-8.0之间(由红变黄) ，所以能用作指示剂，常做活体染色的染料。 植物组织水势和渗透势的测定方法： （二）实验材料 加样器的使用 分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找出与组织水分势相当的浓度，根据原理公式计算出组织的水势。 小麦叶片（取10片叶片，可带叶脉吗？） 第几片叶片？ 植物组织水势的测定 0.5cm 【实验试剂与器材】 实验试剂： （1）亚甲烯蓝粉末； （2） CaCl2 溶液，1M； 实验器材： （1） 10ml具塞刻度试管 7支； （2） 10ml指形试管 7 支 ； （3） 10ml移液管1支； （4） 5ml移液管1支； （5） 1ml移液管1支； （6） 毛细滴管7支； （7） 试管架及解剖针； 【实验步骤】 1.配制0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4M的CaCl2溶液各10ml，混匀（甲组试管） 2.分别吸取1ml至指形试管中，一一对应（乙组试管） 3.取材,0.5cm，切忌过长，平衡30min，振摇3-4次 4.亚甲兰染色,4微升（乙组试管） 5.回滴，观察，记录 6.计算 注意事项：吸取溶液后不能倒置 取材：10片一起剪断同时投入试管中 毛细管放置稳定 挤出小液滴 取出毛细管 观察液滴升降 Ψ’w Ψw Ψ’w＝Ψw Ψ’w Ψw 溶液 材料 溶液 材料 材料 溶液 植物组织水势的测定 【结果计算】 外液浓度 (M) 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 小液流方向 Ψs = - iCRT 单位? R 气体常数 （0.0083Mpa? l ? mol-1 ? K-1） T 绝对温度（K） C 质量摩尔浓度（mol?L-1） i 溶质的溶解系数 ，CaCl 2 i =2.6 纯水的水势为0 浓度高 水势低 吸水 下沉 液滴移动方向 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.05 溶液浓度 无平衡浓度结果 下一步实验设计? 植物组织水势的测定 液滴移动方向 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.05 溶液浓度 错误结果 植物组织水势的测定 液滴移动方向 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.05 溶液浓度 结果是否正确，为什么？ 植物组织水势的测定 结果是否正确，为什么？ 液滴移动方向 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.05 溶液浓度 植物组织水势的测定 注意事项： 1.要先配好溶液再取材料，并且取材操作要迅速，避免材料失水，结果数据不准确。 2.溶液回滴时动作一定要慢，要将毛细管尖端放在溶液的中部，再轻轻挤出有色溶液一滴，小心取出毛细管。 3.所取材料在植株上的部位要一致，要避开主脉和伤口。 【思考与作业】 记录实验结果； 描述现象； 计算。 1、用小液流法测定植物组织水势时，为什么应强调所用试管、毛细管应保持干燥？ 2、如果某一支试管内多加入或者少加入 一个叶片对结果有无影响？如果有会有什么影响?为什么？ 压力室法测定植物组织水势 植物叶片通过蒸腾作用不断向环境散失水分，产生蒸腾拉力。导管中的水分由于“内聚力”的作用而形成连续的水柱。因此，对于蒸腾着的植物，其导管中的水柱由于蒸腾拉力的作用，承受着一定的张力或负压，使水分连贯地向上运输（图A）。 当叶片或枝条被切断时，木质部中的液流由于张力解除迅速缩回木质部（图B）。 将叶片装入压力室钢筒，叶柄切口朝外，逐渐加压，直到导管中的液流恰好在切口处显露时，所施加的压力正好抵偿了完整植株导管中的原始负压。这时所施加的压力值（通常称为“平衡压”）将叶片中的水势提高到相当于开放大气中导管中液体渗透势ψs（sap）的水平（图C）。 植物组织水势的测定 第一讲实验 一 ：植物细胞的观测——植物细胞活体染色及死活鉴定实验十三 ：植物组织水势的测定——小液流法 张晓燕 zhangxiaoyan@cau