(植物生理学实验)植物种子生命力的快速测定.ppt

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实验05-01 植物种子生命力的快速测定 在农业生产中,种子是最基本的生产资料,只有具有生命力的种子才能发芽、成苗。因此,测定种子的生命力特别是种子活力是生产中最为关心的问题之一。 Ⅰ TTC法 一、实验原理 TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶于水的红色三苯甲腙(TTF): 应用TTC溶液浸泡种子,使之渗入种胚细胞内,如果种胚具有生命力,其中的脱氢酶就可以将TTC作为受氢体使之还原成为三苯甲腙而呈红色,根据种胚着色情况可鉴定种子的生命力。 Ⅱ 染料染色法 一、实验原理 有生命力的种子胚细胞的原生质膜具有半透性,有选择吸收外界物质的能力,染料一般不能进入细胞内,胚部不染色;丧失生命力的种子,其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,染料可自由进入细胞内使胚部染色。因此,可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。 二、材料、设备与试剂 (一 )实验材料 小麦、玉米种子 (二)设备 1. 小烧杯;2. 刀片;3. 镊子;4. 温箱 (三)试剂 0.5 g/100mL TTC溶液 , 5%红墨水 三、实验步骤 四、结果记录与分析 根据种胚的染色情况判断种子活力并统计死活种子的百分率。 五、结果计算 分别计算玉米和小麦活种子的百分率(4个结果) 种子生活率(%)=(活种子数/总种子数)100% 六、注意事项 (1) TTC染色结束后要立即进行鉴定,因放久会褪色。 (2)红墨水染料的浓度要适当,染色时间不能太长,只需5分钟即可,否则不易区别染色与否。 实验05-02 谷物淀粉含量测定(旋光法) 淀粉不仅是重要的营养物质,也是重要的工业原料之一。测定淀粉含量对于鉴定农产品品质和改进农业技术具有重要意义。 一、实验原理 淀粉在盐酸的作用下可水解成葡萄糖,葡萄糖具有旋光性,根据旋光性的大小可计算出淀粉含量。 二、材料、设备与试剂 (一 )材料 小麦面粉 (二)设备 旋光仪、 天平、 水浴锅、 容量瓶、试管等 (三)试剂 1.12%HCl;30%硫酸锌;15%亚铁氰化钾 三、实验步骤 四、原始数据 五、结果计算 :样品旋光度; :小麦面粉比旋光度(+182.7); L:测定管长度(dm); W:样品质量(g) 六、注意事项 1、面粉水解时从水浴沸腾开始计时,以保证淀粉被充分水解;必要时,可以KI-I2试剂检测淀粉是否水解完全; 2、定容时如溶液中泡沫较多,可加1-2滴乙醇消除泡沫。 * * Designed by XK Wang 1. 温水(约30℃)浸种2~6h,使种子充分吸胀。 2. 随机取种子10粒,沿种胚中央准确切开,分别放到小烧杯中。 3. 将准备好的一份种子浸于TTC试剂中,于恒温箱(30~35℃)中保温30min。 4. 将上试验准备好的另一半种子浸于红墨水中,室温放置5min。倒出红墨水,清水将种子冲洗1~2次,观察种胚被染色的情况。 5. 倒出TTC溶液,清水将种子冲洗1~2次,观察种胚被染色的情况。凡种胚全部或大部分被染成红色的即为具有生命力的种子;种胚不被染色的为死种子。 红墨水 TTC 小麦种胚未染色数 小麦种胚染色数 玉米种胚未染色数 玉米种胚染色数 种子 1. 称取样品2.5 g于大试管中,取40 mL HCl,先将少量HCl加入试管,利用玻璃棒将样品调成糊状,再将剩余HCl将管壁样品颗粒洗下。 2. 将大试管置于沸水浴中反应15 min后取出,迅速冷却至室温。 3. 将样品完全转入100 mL容量瓶→ 加入1 mL硫酸锌,摇匀→加1 mL亚铁氰化钾,摇匀→用蒸馏水定容至刻度,摇匀→ 干滤纸过滤,收集滤液。 4. 测定:仪器预热10 min;调零;测定样品液。 * *

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