07-分析灵敏度和功能灵敏度.pptVIP

毒品检验;肿瘤标志物;特定蛋白;核酸;激素;某些常用项目等。需要有可检出的最低浓度或某个量. 以下介绍的分析灵敏度分为 具定性含义的检测低限； 具定量含义的生物检测限； 及功能灵敏度。 二．检测低限(LLD,Lower Limit of Detection) 每次检测，总是做一个空白样品。检测方法常以空白响应量校准至零点，再检测各个检测样品的反应响应量。 但是，空白响应量也有波动.若重复多次作空白检测,，以空白（响应量）均值和标准差表示这些空白响应量的平均水平和所有空白响应量对于空白均值的离散程度指标。 在确定方法性能或绘制标准曲线时，常常以空白均值表示空白响应量。实际工作时，每次只做一个空白，各有50%的可能性，这个空白响应量大于或小于空白均值。 当空白响应量小于空白均值，对同一个样品检测响应量（未扣除空白响应量），似乎反映分析物要多一点，检测方法好象灵敏些。 当空白响应量大于空白均值，似乎原先可以检测出来的分析物现在测不出了。 因此，检测方法必须要说清楚： 究竟怎样才算是可检测出来的分析物量？ 标准曲线是从零开始的，是不是分析物量可以从零开始？ 这就检测低限要回答的问题。 统计说明，如果服从正态分布规律：各个单次检测的空白响应量有95%的可能性为： －2S空白≤X空白≤ +2S空白 即： ︱X空白－ |≤2S空白 检测响应量较空白响应量均值大 ，仍然认为是空白响应量的可能性只有5%；有95%的可能性属于样品内有分析物形成的检测响应量，它较空白均值差 以上。 响应量较空白均值相差 以上的，还认为是空白响应 量的可能性仅0.3 %；而有 99.7%的可能性是样品内有 分析物形成的响应量。 所以若检测样品的反应响应量 较空白均值大，但相差2或 以下的，只能说这些 响应量是空白样品单次检测的 响应量，样品内没有分析物， 或者表示：分析物量为零。 检测低限定义为样品单次检 测可以达到超过2或 的检测响应量对应的分析物 量。检测系统或方法对小于 或等于检测低限的分析物量 只能报告“无分析物检出”。 通常估计95%或99.7%的两种可能性： 95%可能性： LLD= X空白+2S空白 99.7%可能性： LLD= X空白+3S空白 注意:直接读出浓度单位的检测系统对低于零的检测将报告零，其分布不是正态的，因此计算的均值和标准差不能如实表达检测低限的真实情况。 检测响应须以初始值表示，如：吸光度、荧光、等，此时S空白是有效的。 由初始值计算均值和标准差，然后再转换成浓度单位。 三．检测生物限（BLD,Biologic Limit of Detection,） 大于检测低限的响应信号，方法还不能正确报告定量结果。因为在这样低的浓度或其他量值的范围内，单次检测样品的反应响应量重复性较差。那么在多少检测响应量时才能较好地报告定量结果呢？ 甲球生物检测限计算示意图 甲球生物检测限计算归纳 直接胆红素的性能特性 线性 线性上限为599 mmol/L 检测限 为0.17 mmol/L（0.01 mg/dl） 定量限值（功能灵敏度） 1.88 mmol/L(0.11 mg/dl) ALT检测的性能特性 线性 上限达943.7 U/L 检测限 1.8 U/L 定量限值（功能灵敏度） 4.5 U/L 本词语较完善地表示实际样品的定量检测限度。在证实厂商的BLD说明时，应使检测限样品的浓度和厂商的说明相同。 分析灵敏度（检测限） 三.功能灵敏度（Functional Sensitivity,FS）功能灵敏度定义为：以天间重复CV为20%时对应检测限样品具有的平均浓度，确定检测系统或方法可定量报告分析物的最低浓度或其他量值的限值。? 分析灵敏度（检测限） 为了估计FS，须用多个检测限浓度来确定在低浓度处的精密度表现，从中选择具有或近似20% CV的某检测限浓度，确定为方法的功能灵敏度。在证实厂商的 FS的说明时，使用的检测限样品浓度应和厂商的说明相同。 分析灵敏度（检测限） 四．实验须考虑的因素 一般制备两种不同类型的样品。 一个是“空白”样品，即不含有分析物，分析物浓度为零。 第二个是”检测限”样品，即含有低浓度的分析物。 分析灵敏度（检测限） 在有些场合下，需要备几份”检测限”样品。空白和检测限样品由检验方法作重复检测，计算各自的均值和标准差。不同的检测限由空白和检测限样品数据计算出来。 分析灵敏度（检测限） ?1.?空白液：一份空白液用作空白检测，其他用于制备检