禽流感疫苗的制作.pptVIP

禽流感疫苗的制作及相关问题 石家庄神九畜禽疾病防治及 药物研究所汇编 主要程序（国家法律和相关规定：要求有严格的生产条件和相应的法规批准） 一、病毒的分离、鉴定和纯化。有的毒株进行基因重组。 二、毒株的扩增、收获、检测灭活。有的病毒根据需要进行裂解。 三、灭活液的检测。水相的制作。 四、油乳剂苗的制备及检测。 禽流感病毒的模样及模式图(左边图中蓝急小球为禽流感病毒实境图片，右边图为禽流感的模式图） 历年的禽流感病毒（2001年、2004年2008年2009年） 免疫逃逸产生的原因及疫苗厂、种禽场和大型养殖场的应对措施 许多种鸡场和商品代养殖场打了疫苗，抗体还比较高，在禽流感流行时，仍出现大批死亡。即“打了苗了不顶事”！是什么原因造成了这种“免疫逃逸”现象呢？主要原因是禽流感毒株发生了变异。以前的抗体不顶用或起不到理想的作用了。 另外世界卫生组织指出，使用不对型的毒株所做的疫苗反而会加大禽流感毒毒株变异的机会。所以相关科研机构、疫苗厂和兽医部门不能在垄断科研生产经营的同时又不及时做新病毒的分离和生产疫苗，这样养殖场的损失太大！谁也承受不起。 当前最好的方法就是打规定疫苗的同时，能配上当地的毒株所制的疫苗，是相对保险一些的方法。 工作步骤：一、病毒分离 选取相应的器官组织进行摘取。 加广谱抗生素 进行组织捣碎 反复冻融 检测细菌。 病毒提取液接种 选用合适（9~11）日龄的鸡胚和优秀的SPF胚 选择恰当的注射部位（尿囊腔等） 制作有严格的条件要求 检测 鸡胚内不能有菌 病毒要进行鉴别,要除去可能其它病毒 要注意H5病毒对鸡胚的致死时间有时与其它普通病毒不一致。 毒株的检测与处理 纯化后的毒株可以做进一步的基因重组工作。基因重组的毒株安全性提高了，做成苗后的相对于原毒株的抗体完全表达下降了。家禽一般不用裂解苗。（人用甲流是裂解苗，产生的抗体要低） 目前最有效的方法就是各地及时分离当地的毒株，效果最好。 许多养殖场中总在问，今年的毒株是杠几？（—1？—4？—5？）其实流感毒株永远在变，每年都是新的。可以说有它以来它就没有重复过。我们只能说它与那个毒株基因相近或某一疫苗对它的保护率高一些。 世界范围内的禽流感流行和病毒在传播过程中不断地当地的毒株进行重组或基因交换使得禽流感毒株过二到四年就有一个变化，使得以前有效的疫苗变得无效。 及早地分析当地的毒株并进行毒株测序和利用新的野毒株检测疫苗有效性是一种较为可行的方法（比如有的学者用攻毒试验发现H5re—1、re—5株对08年的禽流感毒株保护率低于8%。这也就是08年为什么出现打苗的鸡也有大批死亡的原因。用老百姓的话说：“病毒变异了，以前的苗不顶事了”。） 河北省07年08年疾病流行图（仅供参考） 疫苗存在的主要问题及改进措施打了苗后鸡群降蛋，降半成到三四成不等。有些学者做了这方面的研究。检测结果为甲醛超标。 随机抽测了六个疫苗厂21批产品，其中20批不合格，最严重的超标值为8.1倍！ 试验结果显示：合格苗注射后产蛋下降2个点，而不合格的却下降2成多。（当然，苗还有其它原料的问题） 种鸡场和商品代养殖场的措施 1、各场之间相互交流，选择质量好合格的副作用小的疫苗厂的产品。 2、有疾病信息及早交流。避免都受疫病的伤害。 3、有条件的场，可按国家规定在有相关硬应条件的情况及时分离和鉴定新毒株。也可请有关科研机构、定点疫苗厂及时做这些工作。 疫苗生产需要一些严格的条件和相关的国家规定（附参考图片） 油苗的制作 水相与油相比例：1：3 水相中加吐温 油相为白油、司本和硬脂酸铝 用胶体磨将水相与油相混合成胶体。 检测，离心应不分层 灭活水相检测 血凝价检测：胶体金试纸法 微量血疑试验法 胚胎法。盲传三代应正常存活。 无抗体活鸡或SPF鸡检测，应正常存活。 油苗检测，见《生物制品规范》。 禽流感病毒胶体金快速诊断试纸盒能够在早期快速检测测到病毒的侵入。为疾病控制赢得宝贵的时间，并为病毒分离和鉴定提供良好的测定帮助。（09年测到的某种鸡场新城疫与禽流感H5、H9混合感染病例。） 禽流感的最佳处理方法 目前的疫苗防疫法在禽流感病毒不断变异的情况下，养殖场常遭受意想不到的损失。如果有关科研机构和疫苗厂能够及时分离和鉴定新毒株并生产疫苗效果应好一些。这里及时发现和分离鉴定新毒株是关键。否则养殖场只能采取使用通用疫苗再加当地毒株苗的方法来防疫。许多大型鸡场现在被迫采取这种方法。 禽流感最佳的处理方法是。全国范围内灭绝禽流感。各级部门应及时上报而不瞒报疫情，同时建立合理有效的补偿机制。使养殖场也能够积极配合。这样当下成本高，长远有效益。 * ck/bj/df/06 Dk/