(精选)【医学课件课件大全】 人感染H7N9禽流感病毒教学课件.ppt

人感染H7N9禽流感病毒 实验室检测要求 菏泽市疾病预防控制中心检验科 刘启林 2013年4月9日1.H7N9实验室诊断方法。 2.实验室检测策略。 3.标本的采集、包装、保存和运送。 H7N9实验室诊断方法 1.病毒培养分离: 金标准,只要拿到毒株，就能确诊传染病的种类。费时 5-7天. 2.血清学检测：酶病联免疫法（ELISA）费时 急性期、恢复期血清抗体 2-4周 3.核酸检测： 快速敏感特异,可以早期发现病人. Real-Time PCR 实时检测，灵敏度更高 全封闭体系，不需电泳：不易交叉污染，结果更快4-5h。 目前国家推荐使用Real-TimePCR检测方法；市疾控中心流感网络实验室已具备检测能力。 病例1 病例2 病例3 HA核酸同源性比较 三株H7N9病毒为同一基因类型 6个内部片段来源于H9N2 人感染H7N9禽流感病毒序列测定 实验室检测策略 1.不明原因肺炎病例标本检测： 流感网络实验室收到不明原因肺炎标本后，要在12小时内进行标本处理和核酸检测，进行甲型通用引物，甲型H1N1流感，季节性H3N2流感，A（H5）、A (H7)亚型流感病毒以及SARS、新型冠状病毒的检测。如果H5或H7亚型、SARS、新型冠状病毒检测阳性，应将标本立即送省疾控中心进行复核鉴定，省疾控复核阳性的标本，在24小时内送国家流感中心进行复核鉴定和病毒分离。 采样材料 无菌拭子 采样管 专用记号笔 采样登记表 签字笔 采样液 可封口塑料袋 标本送检箱 个人防护设备(PPE） 标本采集要求 1.做好个人防护： 采集标本时应穿戴N95口罩、隔离衣、手套 帽子必要时使用防护镜或面罩。 2.信息完整： 疑似人感染H7N9禽流感病例标本送检单姓名\性别\年龄\职业\现住址\发病日期\标本种类\标本量\采集日期\备注。 标本采集要求 3. 选择不易破损的采样管 4.采样液： Hanks氏液或MEM/DMEM液。禁用生理 盐水，PBS。 5.避免污染：减少细菌污染，避免接触含菌较高的部位；避免与病人检材交叉污染。 标本采集方法 1.咽拭子标本 采样时，让受检者 尽量张开口，用压舌板 将舌头轻轻压下， 用灭菌拭子擦拭 双侧扁桃体及咽后壁， 将棉签头部浸入采集液中， 尾部弃去，拧紧盖子。 2.鼻咽拭子标本 将无菌拭子轻轻插入 鼻道内鼻腭处，停留片刻后 缓慢转动退出，将棉签头部 浸入采集液中，尾部弃去， 和采集的咽拭子放入同一 采样管中，拧紧盖子。 3.鼻咽抽取物 用与负压泵相连的收集器 从鼻咽部抽取粘液。 先将收集器头部插入鼻腔， 接通负压，旋转收集器头部 并缓慢退出。收集抽取的粘液， 并用采样液3ml冲洗收集器3次。 鼻咽吸取装置 标本采集注意事项 1、采集咽拭子时 ，要让病人头部微仰，嘴张大，露出两侧咽扁桃体，手持拭子在病人两侧扁桃体用力来回擦拭至少3次，然后再在咽后壁中央擦拭至少3次。 2、采集鼻咽拭子 时要将采集的一支咽拭子和一支鼻拭子，放入同一采样管中,以便提高检出率。 标本采集注意事项 3、采集血清标本时，要空腹采集静脉血3-5ml，沿管壁慢慢注入采血管中，防止溶血现象发生。置室温数小时，待血液完全凝固后，1500-2000rpm离心10分钟，将血清转于血清保存管，做好标记。 4、采样管应放在放有冰排的冷藏箱中，带到采样地点，采样后要尽快转送4℃冰箱短时保存或尽快送流感网络实验室。 标本包装 1.在采样管上用专用记号笔做好标记，用塑料袋密封，每袋装一份标本。同时填写疑似人感染H7N9禽流感病例标本送检单，用塑料袋密封 。 2.将装采样管的密封袋放入专用标本送检箱内，放入冰排，以柔软物质填充，填充物应具吸水性和缓冲能力。所有容器必须有生物危险标识，警告用语或提示用语。 标本保存 1.标本采集后应在4 ℃条件下24小时内运送到流感网络实验室，未能24小时内送至实验室的，应-70 ℃以下保存，标本应尽量避免反复冻融。标本采集一式二份，其中一份单独保存，以备复核。 2.用于病毒分离和核酸检测的标本，24小时能够检测的可置于4℃保存，24小时内无法检测的置于-70 ℃或以下保存。。 3.血清可在4 ℃放1-3天，-20 ℃以下可长期保存 标本运送 1. 标本送检应有专人专车运送，送检人员不少于２人，要具有高度责任心，相关专业知识，接受过生物安全培训。 2.标本送达实验室后，接收人员应做好个人防护在生物安全柜内取出标本，核对标本送检表和流行病调查表后填写标本接收单，标本送检箱消毒后方可带出实验室。