动物细胞融合与单克隆抗体复习.ppt

2.3.2 动物细胞融合 与单克隆抗体 一、动物细胞融合 1、概念：动物细胞融合也称为 ，是指两个　 　　或多个细胞结合形成一个细胞的过程。融 　　合后形成具有原来两个或多个细胞遗传信 　　息的单核细胞，称为　　　细胞。 ２、原理：_____________(与植物原生质体融 　　合的基本原理______) ３、方法：物理方法_______________ 　　　　　化学方法_________ 生物方法_________ 　　常用的诱导因素有：____、____、_____ 4、过程： 讨论：为什么用灭活的病毒作为动物细胞融合的诱导剂呢？ 讨论：在进行两种细胞融合的实际操作中，是只用单个的两种细胞吗？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 目前常用的细胞融合方法融合率都不是１００％仅用两个细胞融合，其效率太低，不一定能得到融合细胞．即使两个细胞已发生融合，也并不一定是研究者期望得到的细胞类型． ５、意义： 细胞融合技术突破了___________的局限，使远缘杂交成为可能。 ６、用途： 　　动物细胞融合技术最重要的用途是_____。 二、单克隆抗体的制备 （一）与血清抗体的区别 １、血清抗体： 缺陷：从动物血清中分离所得的抗体，产量 　　　低、纯度低、特异性差，反应不够灵敏。 获取方法：向动物体内反复注射某种抗原， 　　　　　使动物产生抗体。 ２、单克隆抗体： 由单个B细胞通过无性繁殖（克隆）形成细胞群，进而产生的化学性质单一，特异性强的抗体。 （二）制备 示意图 讨论回答下列问题: 1.如何使B细胞与骨髓瘤细胞融合? 2.融合后得到的细胞一定是杂交瘤细胞吗? 会出现几种细胞,如何能得到杂交瘤细胞? 3.在单克隆抗体的制备过程中,有几次筛选? 每次筛选的目的是什么? 4.最后杂交瘤细胞如何培养来获得大量的 　　 　单克隆抗体?哪种方法易于培养? （二）制备 1.过程 文字图解 2.杂交瘤细胞的特点: 3.单克隆抗体优点: 给小鼠注射羊红细胞（特定的抗原） 从中分离B淋巴细胞 灭活病毒　　　　　融合 未融合细胞 融合的杂种细胞 融合的具同种核的细胞 选择培养基 杂交瘤细胞 克隆 检测 小鼠培养 体外培养 单克隆抗体 培养骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞 既能大量增殖,又能产生专一抗体 特异性强,灵敏度高,产量大 例:如下图所示．下图是单克隆抗体制备过程示意图， 据图回答： （1）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得------------细胞，该 细胞能够产生------------------。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射---------------------------类物质。 B淋巴 特异性抗体 抗原 例:如下图所示．下图是单克隆抗体制备过程示意图， 据图回答： （2）B过程是一个--------------------------------过程，该过程的进行需要灭活的----------------或-------------------的诱导；杂交瘤细胞继承了----------------------------------------------------------------------------------。 （3）图中D进行细胞培养，目的是------------------------------------。 抗原动物细胞融合 病毒 聚乙二醇 双方细胞的的遗传物质，能产生特异性抗体，并能在体外培养条件下大量繁殖 挑选出能够产生单 克隆抗体的细胞群 例:如下图所示．下图是单克隆抗体制备过程示意图， 据图回答： （4）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面， 与常规抗体相比，其特点是------------------------------------------------。 特异性强，灵敏度高