葛根芩连颗粒剂03.ppt

背景 葛根芩连汤是经典古方之一，来源于东汉末年张仲景所著《伤寒论》第34条:“太阳病，桂枝证，医反下之，利遂不止，脉促者，表未解也，喘而汗出，葛根黄芩黄连汤主之”。葛根芩连汤的组成为:葛根半斤，甘草二两( 炙) ，黄芩三两，黄连三两。上四味，以水八升，先煮葛根，减二升，内诸药，煮取二升，去滓，分温再服。葛根芩连汤有解表清里、升清止利之效。用于治疗太阳表邪内陷所致肠热下利证, 是表里双解的代表方。 随着社会的发展和生活节奏地加快，人们对服用剂量小、储存和携带方便的“中药配方颗粒剂”的需求将迅速发展。故我们以葛根芩连汤为对象，采用现代科技手段开发成为“中药配方颗粒剂”，从提取工艺进行研究，探索中药配方颗粒剂现代化的研究方法 总流程 分述 1.物料前处理 所需药材： 葛根 200g 药物 解表退热，治下利，为君药 黄芩 45g 药物 清热燥湿，厚肠止利，为臣药 黄连 45g 药物 清热燥湿，厚肠止利，为臣药 炙甘草 30g 药物 甘缓和中，调和诸药，为佐药 葛根粉 适量 辅料 赋形、吸附及黏合的作用 包含步骤：净制、切制、炮制、干燥 使用设备：筛药机、洗药机、切药机、炒药机、灭菌设备等。 经过前期对提取工艺实验的研究考察，确定提取工艺为葛根与甘草合煎，黄芩与黄连浸渍醇提。 葛根120g与炙甘草30g加8倍水微沸回流1h，过滤后保留滤液，将滤渣加8倍水微沸回流0.5h，过滤合并两次滤液； 浓缩滤液至500ml，加入等量的75%~80%乙醇充分混合均匀，静置冷藏12h，滤过纯化，回收乙醇，滤液留用； 黄芩、黄连各45g，加50%乙醇500ml浸渍42h，过滤，回收乙醇，适当浓缩，加水处理除去杂质，并冷藏12h，滤过纯化，滤液留用； 合并上述两种浓缩液；浓缩至稠膏状。 辅料选择：中药颗粒剂的常用辅料有吸收剂、黏合剂等，对于含挥发油、稠浸膏较多的颗粒剂，吸收剂的选用尤为重要，常用的吸收剂有两种，一种是天然或合成的化合物（糖粉、糊精等），另一种是药材细粉。后者“出粉率”高，对液体“容纳量”大，代替辅料，不失为混悬型中药颗粒剂辅料选用的独到之处。可以弥补糖类辅料对疾病治疗的负面影响。 取浸膏质量5倍的葛根细粉，与稠膏状样品混合，加入70%乙醇少许制成软材。 软材过14目筛； 将湿颗粒迅速干燥，在厢式干燥器中60℃～80℃干燥24h，干燥温度逐渐上升（否则颗粒表面干燥过快，表面易结硬壳影响内部水分蒸发）； 用一号筛（2000μm）和五号筛（180μm）双筛分取。得到颗粒。（中粉） 湿粒在干燥后，可能有结块粘连，需再通过摇摆式颗粒机一号筛（12~14目）整粒，大颗粒磨碎，再通过四号筛（60目）除去小颗粒或细粉。筛下的小颗粒和细粉可重新制粒，或并入下次同一批号的药粉中，混匀制粒。 葛根芩连汤全方中化学成分非常丰富、复杂, 利用HPLC进行全方及4个组方药物葛根、甘草、黄芩、黄连中多成分的同时定性测定, 色谱信息丰富、各色谱峰分离度较好且色谱分离时间相对较短( 90 m in内), 可快速鉴定复方中的成分, 明确复方的物质基础, 有效提高葛根芩连汤及葛根、黄芩、黄连、甘草质量控制的水平, 此外，运用HPLC的方法进行质量检查简单方便。 6.1 色谱条件 色谱柱: Krom asil 100-5 C18 ( 5.0μm, 250mm *4.6 mm ); 流动相: 流动相A 为0.02mol /L醋酸铵加入0.3% 的三乙胺( V:V ), 用1% 冰醋酸调pH 4.3; B 为乙腈, 梯度洗脱: 0~ 10 m in 为15% B, 10 ~ 20 m in ( 15% B →25% B ), 20 ~ 30 m in( 25% B→30% B ), 30~ 45 m in( 30% B→ 40% B) , 45~ 55 m in ( 40% B →50% B ) , 55 ~ 65 m in ( 50% B →65% B) , 65~ 75 m in( 65% B ), 75~ 90 m in( 65% B→75% B) ; 6.2 检测波长 250 nm 检测葛根素、甘草酸,280 nm 检测黄芩苷、黄芩素、甘草苷,柱温: 30 ℃; 进样量: 20 μL。 6.3 供试品溶液的制备 取适量制备好的颗粒剂，将其溶解于适量水中，用滤膜进行过滤，取滤液作为供试品溶液。 6.4 对照品溶液的制备 精密称取各对照品适量, 用甲醇溶解定容, 配制混合对照品溶液。 6.5 精密度试验: 取同一份供试品溶液, 连续进样6次, 结果直观分析各次进样色谱图完全一致。 6.6 稳定性试验: 取同一份供试品溶液, 在48 h内不同时间点进行检测, 结果