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家蝇幼虫抗菌肽天蚕素基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达.pdf
2007，23(4) 中国人兽共患病学报
Chinese ofZoonoses 311
Journal
文章编号：1002—2694(2007)04—0311—08
oftheantibacterial
Cloning peptide
cecropingene
●rid lf T ‘ l ‘- 一 ‘
0t』Ⅵuscadomesticalarvaeandits[usion
● ●11o - · ●‘
in
Escherichiacoli
expresslon
xuJian—hual，ZHU Xiao—ba02，XU Lei—shan2，MAYan2，WANGYan2
Jia—yon92，JIN Qin-yin93，LIU
ABSTRACT：Inthe totalRNAwasextractedfromthreeinstarlarvaeofMuscadomestica，thecDNAse—
presentstudy，the
theORFof was RT-PCR，andthe wasfurther after
quenceencoding cecropinsamplifiedby targetfragment sequencedbeing
clonedintoTvector cDNA ofthemature was PCRwith
pUCm-T．Then，thesequence cecropins by
amplified
as N-terminalrareeodonGGAofE．coliwas tothefavorablecodonGGC，
pUCm-T／cecropintemplate．the changed
plasmid
andaAsncodonAACwasaddedinfrontofthe codenTAAintheC-terminus．Thismutant as
stop genedesignatedmCecropin
wasthen withthefusion vector restrictionandDNA re—
ligated expressionpGEX-4T-1．Afteranalysis sequencing，thepositive
combinant wastransformedtodifferentstrainsofE．colicellsandthefusion wasex—
plasmidpGEX-4T-1／mCecropin protein
afterIPTGinduction．Thefusion was SDSandtheE．coli
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