药学毕业论文--HPLC法测定异烟肼注射液含量.doc

HPLC法测定异烟肼注射液含量 【摘要】 目的 建立用HPLC法测定异烟肼注射液含量的方法。方法 HPLC法，采用Hypersil BDS C18柱，以乙腈0.075 mol·L-1磷酸二氢钠溶液（体积比5∶95）为流动相，流速为1.0 mL·min-1，检测波长262 nm。结果 异烟肼在9.90～99.00 μg·mL-1浓度范围内与峰面积线性关系良好（r=0.999 9），平均回收率100.3%（RSD=1.0%）。结论 本法操作简便，快速准确，重复性好，可作为本品质量控制方法。 【关键词】 HPLC法；异烟肼注射液；异烟肼 　　Abstract:Objective To establish an HPLC method for determining the content of isoniazid in isoniazid injection.Method Samples were analyzed on an Hypersil BDS C18 column using acetonitrile0.075 mol·L-1 sodium dihydrogen phosphate (5∶95) as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL·min-1 and the detection wavelength 262 nm.Results There was a good linearity for isoniazid in the range of 9.90-99.00 μg·mL-1 (r=0.9999). The average recovery was 100.3% with RSD 1.0%.Conclusion The method is simple, rapid and accurate, which is suitable for the quality control of isoniazid injection. 　　Key words: HPLC; isoniazid injection; isoniazid 　　异烟肼注射液为抗结核药，卫生部药品标准采用溴酸钾滴定法测定异烟肼含量［1］。本文参照文献［2］建立了HPLC法测定异烟肼注射液的含量，试验结果表明，本法操作简便，快速准确，重复性好，可用于异烟肼注射液含量测定。 　　1仪器与试药 　　1.1仪器Agilent 1100液相色谱仪（安捷伦公司），Hypersil BDS C18柱（菲罗门公司），TU1901型紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司），AG285电子天平（梅特勒-托利多公司）。 　　1.2试药异烟肼对照品（质量分数99.4%，批号T2006236，广州白云山明兴制药有限公司提供）。异烟肼注射液（批号061101，061102，061103；规格2 mL∶100 mg，广州白云山明兴制药有限公司生产）。乙腈（色谱纯，德国默克公司），磷酸二氢钠（分析纯），水（注射用水，广州白云山明兴制药有限公司自制）。 　　2方法与结果 　　2.1对照品溶液的制备取异烟肼对照品约100 mg，精密称定，置100 mL量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液（0.990 0 mg·mL-1）；精密量取2 mL，置50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得质量浓度为0.039 60 mg·mL-1的对照品溶液。 　　2.2供试品溶液的制备精密量取异烟肼注射液2 mL（约相当于异烟肼100 mg），置100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取2 mL，置50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2.3空白对照溶液的制备除异烟肼外，按处方采用“2.2”项下的方法制备空白对照溶液。 　　2.4色谱条件与系统适用性试验色谱柱为Hypersil BDS C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈0.075 mol·L-1磷酸二氢钠溶液（体积比5∶95），流速为1.0 mL·min-1，检测波长为262 nm，柱温为30 ℃，进样量为20 μL。分别将对照品溶液、供试品溶液与空白对照溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。理论板数以异烟肼峰计算应不低于6 000。空白对照溶液在异烟肼峰处无干扰。结果见图1。 图1对照品（A）、样品（B）及空白对照（C）高效液相色谱图（1.异烟肼）　略 　　2.5 线性关系考察分别精密量取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL对照品贮备液，置50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，依法测定，记录色谱图，以峰面积（A）为纵坐标、质量浓度(ρ)为横坐标计算得回归方程：A=32.697ρ-14.975