[农业]三疣梭子蟹论文：三疣梭子蟹育种核心种质群体有效含量.doc

三疣梭子蟹论文：三疣梭子蟹育种核心种质群体有效含量 【中文摘要】本文以三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）核心基础群快速生长品系即“黄选1号”为实验材料,根据Doyle and Talbot提出的计算有效群体含量的计算公式,对2008年三疣梭子蟹快速生长品系核心育种群有效群体含量进行估算。2009年选择三疣梭子蟹快速生长品系的子代蟹子经越冬后,按有效群体Ne=1,2,3,5,10,20,50梯度进行生产,比较不同有效群体含量对其子代的影响;选择22对三疣梭子蟹多态性好的微卫星标记,经过引物间的搭配、组合测试构建了多重PCR扩增技术体系。多重PCR的反应条件,包括退火温度,Mg2+含量、dNTPs的浓度等参数,最终建立了15个三重PCR组合,3个四重PCR组合,利用其中的两组三重组合,一组四重组合对三疣梭子蟹核心基础群快速生长品系2008年及2009年进行了亲子鉴定,主要结果如下:通过对2008年核心基础群快速生长品系有效群体进行估算,得出实际群体有效含量为213,实际近交系数为0.0023,其近交系数较小,近交衰退控制在较低的水平。但三疣梭子蟹保种数量和留种方式仍然困扰育种群体控制,因此,借鉴畜禽的保种模式,从留种方式、雌雄比例、保种数量等方面对三疣梭子蟹快速生长品系核心基础群进行保种研究,结果表明,采用随机留种,雌雄1:1比例交尾,雌雄数量各131只。此保种模式既能保证三疣梭子蟹快速生长品系核心基础群遗传多样性处于较高水平,使其具有较大的选育潜力,又能使保种成本维持在一个合理水平。此研究模式也为理论保种模式,需要在以后的实际群体选育过程中逐步完善。2009年,选择三疣梭子蟹快速生长品系的子代蟹子经越冬后,按有效群体Ne=1,2,5,10,20,50梯度进行生产,对其溞状幼体第4期、大眼幼体及幼蟹第2期各期的存活率进行计数,发现存活率不存在显著差异（P0.05）。有效群体大小的增加对子代的生长和存活没有显著影响,值得指出的是,虽然在短期内对子一代的表型方面并不存在显著影响,但参加繁殖的亲本个体较少时,其后代群体内个体的亲缘关系较近,导致子代群体遗传多样性较低,因而对核心育种群产生的长期影响不容忽视,这将在今后的研究中加以探讨。选择本实验室研发的22对三疣梭子蟹多态性好的微卫星标记,经过引物间的搭配、组合测试构建了多重PCR扩增技术体系。分别建立了47个二重PCR组合,并在47个二重引物的组合基础上建立15个三重PCR组合和3个四重PCR组合。本实验优化多重PCR的反应条件,包括退火温度,Mg2+含量、dNTPs的浓度等参数。最终建立了多重PCR技术体系,该技术的建立为三疣梭子蟹品种选育、种系评估提供快速、有效分子检测技术。选出优化好的2组三重组合,1组四重微卫星多重PCR组合用于三疣梭子蟹快速生长品系的亲子鉴定,采用人工分型和Cervus3.0模拟的方法对其鉴定率达到了100%,这样可以快速了解各个家系在快速生长品系中的存活情况,指导快速生长品系的选育。根据各个亲本对后代的贡献率的不同,以及父母本的个数,计算了近交系数增量的大小ΔF=0.0058,有效群体含量Ne=88,近交系数增量较小,维持在较低的水平,构建的家系比较符合群体选育水平。总之,微卫星多重PCR基因扫描技术为加速三疣梭子蟹选育进程提供快速高效的检测工具。 【英文摘要】This article based on the Portunus trituberculatus core group of fast-growing strain of “Huangxuan NO.1”as the experimental materials.According to the formulas of effective population size ,which brought forward by Doyle and Talbot,we estimated the effective population size（Ne）for rapid growth line fundamental stock in P.trituberculatus. In 2009, we selected the fast-growing strains of the offsprings through winter, according to the effective population Ne = 1,2,3,5,10,20,50 gradient production, compare the content of their offspring effective population.Selecting 22 pairs of polymorphic m