[基础科学]动物组织和细胞培养.pdf

三 培养细胞的生物学特征 洋蔥的表皮細胞 植物輸導水分的細胞 哺乳類的肌肉細胞 人類脊髓神經細胞 (一)体外培养细胞的分型 1 贴附型： 大多数培养细胞贴附生长，属于贴壁依赖性细胞. 有机体的绝大多数细胞必须粘附于一固相表面才能生存和生 长 按照培养细胞的主要形态，可分为几大类型 1)成纤维细胞型： 胞体呈梭型或不规则三角形，中央有卵 圆形核，胞质突起，生长时呈放射状。 例心肌，平滑肌，成骨细胞，血管内皮 成纤维细胞 2)上皮细胞： 细胞呈扁平不规则多角形，中央有圆形 核，细胞彼此紧密相连成单层膜。 如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、 肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形态。 上皮型细胞 3、游走细胞型： 呈散在生长，一般不连成片，呈活跃游走或变形运动， 方向不规则。此型细胞不稳定，有时难以和其他细胞相区 别。如单核细胞、嗜酸性粒细胞 4、多型细胞型： • 有一些细胞，如神经细胞难以确定其规 律和稳定的形态，可统归于此类。 2 悬浮型： 见于少数特殊的细胞，如某些类型的癌细胞 及白血病细胞。胞体圆形，不贴于支持物上， 呈悬浮生长。这类细胞容易大量繁殖。 (二)培养细胞的生长和增殖过程 1 培养细胞生命期 （Life Span of Culture Cells ） 所谓培养细胞生命期，是指细胞在培养中持续增殖和生长 的时间。 1．原代培养（Primary Culture ）期： 也称初代培养，即从体内取出组织接种培养 到第一次传代阶段，一般持续1一4周。此期细胞 呈活跃的移动，可见细胞分裂，但不旺盛。 ●初代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能 活动上相似性大。细胞相互依存性强。 2．传代期： ●初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系 （Cell Line ）。 ●在全生命期中此期的持续时间最长。 ●在培养条件较好情况下，细胞增殖旺盛，并能 维持二倍体核型，呈二倍体核型的细胞称二倍体 细胞系（Diploid Cell Line ）。 ●为保持二倍体细胞性质，细胞应在初代培养期 或传代后早期冻存。 ●当前世界上常用细胞均在不出十代内冻存。 ●一般情况下当传代10～50次左右，细胞增殖逐 渐缓慢，以至完全停止，细胞进入第三期。 3 ．衰退期： ●此期细胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；细胞形 态轮廓增强，最后衰退凋亡。 ●在细胞生命期阶段，少数情况下，在以上三期任何 一点（多发生在传代末或衰退期），由于某种因素的 影响，细胞可能发生自发转化（Spontaneous Transformation ）。 ●转化的标志之一是细胞可能获得永生性 （Immortality ）。 ●细胞永生性也称不死性，即细胞获持久性增殖能 力，这样的细胞群体称无限细胞系 （Infinite Cell Line ），也称连续细胞系 （Continuous Cell Line ）。 ●无限细胞系的形成主要发生在第二期末，或第三 期初阶段。细胞获不死性后，核型大多变成异倍体 （Heteroploid ）。 ●细胞转化亦可用人工方法诱发，转化后的细胞也 可能永生性. Transformation 1020 培养细胞生命期 Primary 1018 Culture Finite Cell Line Continuous Cell Line r e b 1016 1st Subculture m 原代培养期 u N 2nd Subculture 14 l 10 l e C e 1012 v i Senescence and Cell Death