干扰素的生产与行.ppt

干扰素的生产工艺与市场分析 主要内容 1 干扰素简介 1. 1 干扰素的定义 干扰素是一种细胞因子，它是机体感染病毒时，宿主细胞通过抗病毒应答反应，而产生的一组结构类似、功能相近的低分子糖蛋白。英文名称Interferon，简称IFN。 1.2 干扰素的发现 干扰素是1957年英国科学家Isaccs等发现的。他们把灭活的流感病毒作用于小鸡细胞，结果发现这些细胞产生了一种可溶性物质，这种物质能抑制流感病毒，并且能干扰其它病毒的繁殖，因此，他们将这种物质称为“干扰素”。以后科学家们进一步发现，机体对入侵的异种核酸（包括病毒）都产生干扰素以进行防御。当机体细胞受到病毒感染时，机体细胞产生干扰素，干扰病毒复制，它是机体抗病毒感染的防御系统。?  1.3 天然干扰素的分类 1. 根据来源、基因序列和氨基酸组成分类 ◆ I 型干扰素：IFNα、IFNβ、IFN τ、IFN ω 来源：白细胞、成纤维细胞、病毒感染的组织细胞等 功能 ：抗病毒感染、抗肿瘤生长 、免疫调节(较弱） 其中IFN-α为多基因产物，有23种以上的亚型。 ◆ II 型干扰素：干扰素γ（IFN?) 来源：活化的T细胞和NK细胞产生 功能：免疫调节 提高单核巨噬细胞、树突状细胞的抗原提呈能力 增强Tc细胞和NK细胞的杀伤活性 抑制TH2细胞形成，下调体液免疫应答 趋化作用 抗病毒和抗肿瘤作用（次要） 2. 根据动物来源确定分类 人干扰素（HuIFN），小鼠干扰素（MuIFN）。 上市重组干扰素: α2a、α2b、α1b、 β1b，γ 1992年我国第一个基因工程药物IFN-α1b获得国家一类新药证书。 研发中的重组干扰素：IFN ω，临床阶段 1.4 干扰素的作用机制 干扰素不能直接灭活病毒，而是通过诱导细胞合成抗病毒蛋白（AVP）发挥效应。干扰素首先作用于细胞的干扰素受体，经信号转导等一系列生休过程，激活细胞基因表达多种抗病毒蛋白，实现对病毒的抑制作用。抗病毒蛋白主要包括2′-5′A合成酶和蛋白激酶等。前者降解病毒mRNA、后者抑制病毒多肽链的合成，使病毒复制终止。 ①间接性：通过诱导细胞产生抗病毒蛋白等效应分子抑制病毒。 ②广谱性：抗病毒蛋白是一类酶类，作用无特异性。对多数病毒均有一定抑制作用。 ③种属特异性：一般在同种细胞中活性高，对异种细胞无活性。 ④发挥作用迅速：干扰素既能中断受染细胞的病毒感染又能限制病毒扩散。在感染的起始阶段，体液免疫和细胞免疫发生作用之前，干扰素发挥重要作用。 不同来源的干扰素 1.5 重组干扰素的临床应用 广谱抗病毒活性（rhuIFNα） 慢性乙型、丙型、丁型肝炎；疱疹、病毒性角膜炎。 直接抗肿瘤活性（rhuIFNα） 毛细胞和慢性髓样白血病、 Kaposi肉瘤、非霍奇金淋巴瘤。 免疫调节活性——治疗慢性肉芽肿瘤（rhuIFNγ） 多发性硬化症 rhuIFNβ 1.6 干扰素适应症 目前使用干扰素治疗的主要对象是慢性乙型和丙型肝炎的病人，而且在乙型肝炎病人中，有以下情况应用干扰素治疗反应较好 1.治疗前血清ALT或AST有反复波动或酶的活力持续升高者； 2.治疗前血清HBeAg的P/N值偏低(P/N 5～8)或HBV DNA水平低(100Pg/ml)者； 3.病程较短者； 4.肝脏病理有活动性炎症病变(如有碎屑样坏死)者疗效佳； 5.无重叠感染者(如丙型、丁型肝炎等)； 　 6.无HIV感染或免疫抑制剂治疗者； 7 肝组织内含铁量低者； 8.治疗期间血清中无干扰素中和抗体产生者 9.女性患者疗效比男性为佳。 2 干扰素生产工艺的发展 干扰素生产工艺路线（1） 体外诱生干扰素制备工艺： Sendai病毒诱导人白细胞 1989年：IFNα-n3/Alferon，批准上市 产量低：1g IFNα，需要 3亿ml人血白细胞 来源困难，工艺复杂，收率低，价格昂贵 潜在的血源性病毒污染的可能性 干扰素生产工艺路线（2） 人源转化细胞系培养生产工艺： 1999年：IFN α-n1/Wellferon, 批准用于临床。 优点：首次实现大规模商业化生产。 缺点： 活性低，退出临床应用。 干扰素生产工艺路线（3） 干扰素生产工艺路线（4） 上市产品：rhuIFN β-1a 1996， Avonex(Biogen)； 2002， Rebif(Serono) 表达产物：166 aa 糖基化蛋白，22.5 ku 工艺特