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拟南芥愈伤组织诱导试验 摘要 拟南芥外植体在MS培养基和不同的激素组合下都能不同程度地形成愈伤组织并进一步形成植株。不同浓度的激素组合诱导拟南外植体形成芥愈伤组织的效率不同。1.5mg/L6-BA和0.01mg/LNAA、0.5mg/L6-BA和0.1mg/LIAA、2.0mg/LZT和0.2 mg/LNAA、1.5mg/LZT和 0.2mg/LIAA的激素组合诱导出愈伤组织的效率最高。 关键词 愈伤组织 拟南芥 MS培养基 Arabidopsis callus induction test Abstract Arabidopsis explants on MS medium with different hormone combinations can be formed in varying degrees, the formation of callus and further plants. Combination of different concentrations of hormone induction of the Arabidopsis mustard explants callus formation efficiency of different.1.5mg/L6-BA and 0.01mg/LNAA, 0.5mg/L6-BA and 0.1mg/LIAA, 2.0mg/LZT and 0.2 mg / LNAA, 1.5mg/LZT and 0.2mg/LIAA combination hormone induced callus the most efficient organization. Key words callus Arabidopsis MS medium 拟南芥(Arabidopsis)又称鼠耳芥，是十字花科拟南芥属植物，它有许多生态变种, 有很短的生命周期(5—6周) , 染色体数目少, 其单倍体基因组约为7 x 1) 碱基对, 在高等植物中是最小的,主要分布在亚洲、非洲和欧洲，我国华东、中南、西南及新疆也有分布，有许多生态型。作为植物发育生物学和分子生物学研究的重要模式材料，在国际植物发育生物学研究和植物分子生物学领域的突破性进展中，拟南芥扮演了十分重要的角色。开展拟南芥的植株再生和悬浮细胞系培养工作具有重要的意义。 因此长期以来一直是植物细胞遗传学研究的经典模式材料同时也是植物胚胎学的重要研究对象。近年来植物学家对拟南芥菜进行了广泛的人工诱变, 分离和鉴定出各种各样的突变体, 在分子水平上研究其基本生命现象、发育和分化、形态发生和遗传传递等 拟南芥菜的组织培养、细胞培养已有报道但多是做为基因转化的基础研。对于其愈伤组织的起源、增殖和再分化的研究却不多见本文的目的是通过细胞形态学方法来研究愈伤组织的诱导和植株再生过程。 1．材料与方法 1.1 材料 野生型拟南芥叶片; 萘乙酸(NAA )、6-苄基腺嘌呤( 6-BA)、生长素（IAA）玉米素（ZT）、蔗糖、琼脂粉等试剂。 1.2 方法 1.2.1拟南芥愈伤组织诱导培养基 以MS培养基为基本培养基, 附加一定种类和质量浓度的激素。设置附加。将上述培养基调pH至5. 8, 121℃灭菌20分钟。MS培养基及不同培养基的激素浓度配比分别见表1和表2。 表1：Ms基本培养基组成 分类 药品名称 含量（mg/L） 大量元素 硝酸钾 1900（mg/L） 硝酸铵 1650（mg/L） 硫酸镁（七水合） 370（mg/L） 氯化钙（二水合） 44 0（mg/L） 磷酸二氢钾 170（mg/L） 铁盐 硫酸亚铁（七水合） 27.8（mg/L） EDTA-Ｎａ盐 37.3（mg/L） 微量元素 硫酸锰（四水合） 22.3（mg/L） 钼酸钠（二水合） 0.25（mg/L） 硼酸 6.2（mg/L） 硫酸锌（七水合） 8.6（mg/L） 硫酸铜（五水合） 0.025（mg/L） 碘化钾 0.83（mg/L） 氯化钴（六水合） 0.025（mg/L） 有机元素 有机元素 肌酸 100（mg/L） 烟酸 0.5（mg/L） 甘氨酸 2（mg/L） 维生素B6 0.5（mg/L） 维生素B1 0.1（mg/L） 碳源 蔗糖 30（g/L） 琼脂 0.45% 表2：不同培养基激素种类及浓度配比 6-BA浓度（mg/L） NAA浓度（mg/L） IAA浓度（mg/L） 0 0.01 0.05 0.1 0.2 0 0.01 0.05 0.1 0