试验十四血清胆红素测定改良J-G法.DOC

实验十六 血清胆红素测定 （改良JG法血清胆红素测定的原理咖啡因苯甲酸钠醋酸钠碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的蓝色偶氮胆红素，在600nm波长比色，从标准曲线查找总胆红素和结合胆红素含量。恒温水浴箱碱性酒石酸钠溶液酒石酸钠 （3）胆红素标准贮存液（171μmol/L）： 准确称取符合要求的胆红素10mg，加入二甲亚砜1ml，用玻璃棒搅拌，使成混悬液。加入0.05mol/L碳酸钠溶液2ml，使胆红素完全溶解后，移入100ml容量瓶中，以稀释用血清洗涤数次并入容量瓶中，缓慢加入0.1mol/L盐酸2ml，边加边摇（勿用力摇动，以免产生气泡）。最后以稀释血请加至刻度。配制过程中应尽量避光，贮存容器用黑纸包裹，置4℃冰箱3天内有效，但要求配后尽快作校正曲线。 【操作】 取试管3支，按下表操作： 表3-20 改良J-G法测定血清胆红素 加人物(m1) 总胆红素管 结合胆红素管 空白管 血清 0.2 0.2 0.2 咖啡因试剂 1.6 - 1.6 对氨基苯磺酸 - - 0.4 重氮试剂 0.4 0.4 - 1分钟叠氮钠 - 0.05 - 咖啡因试剂 - 1.- 室温10分钟碱性酒石酸钠 1.2 1.2 1.2 600nm波长比色以空白管调零，读取各管吸光度。从标准曲线查胆红素加人物(m1)总胆红素.2μmol/L时为隐性黄；34.2μmol/L时，巩膜黄染，称黄疸。