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普通光学显微镜的使用及微生物的简单染色课件幻灯片.pptVIP

普通光学显微镜的使用及微生物的简单染色课件幻灯片.ppt

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实验五、普通光学显微镜的使用及微生物的简单染色 ⒈ 实验目的 ; ⒉实验材料 ; ⒊显微镜的构造 ; ⒋油镜的原理 ; ⒌实验任务 ; 6.实验步骤; 7. 实验报告 ; 8.下次实验。 内容提要: 实验1、观察制备好的装片 ; 实验2、每个同学自己动手单染三张 片子进行观察 ; 一、实验目的: 1.学习普通光学显微镜的构造和功能; 2.学习并掌握油镜的原理和使用方法; 3.学习微生物的简单染色,观察细菌的 形态。 返回 二、实验材料: 显微镜 载玻片 香柏油 擦镜纸 双层瓶 染色剂 滴管 菌液 返回 三、显微镜的构造: 1、机械系统 ( P15图1): A)单筒显微镜: B)双筒显微镜 C)倒置显微镜 ???????????????????????????????????????????????????? 显微镜的发展历史(补充内容): =》 =》 R.虎克在17世纪中期 19世纪中期的显微镜 20世纪初期 制做的复式显微镜 的显微镜 ????????????????? ? ?? ??????????????? ?????????????????? 续上: 带自动照相机 装有场发射枪的 超高压透射 的光学显微镜 扫描电子显微镜 电子显微镜 =》 =?》 ???????????????????????? ??????? ??????????????????? ?????????????????????????? 2、光学系统 (P15图1) 在光学系统中 ,物镜的性能最为关键,分为低、高、油镜头。油镜的放大倍数最大,在使用时比较特殊,需要在载玻片与镜头之间加滴镜油——香柏油。 返回 四、油镜的原理: 放大倍数可100倍之大,焦距很短,光强度最大。 油=1.52(香柏油) 介质折射率 水=1.33 空气=1 玻璃=1.55 香柏油对光的折射率与玻璃相似,光线直接通过香柏油进入物镜而不发生折射,不但增加了照明度,而且使油镜的数值孔径增加,用NA表示,一般在1.2—1.4。低高倍镜头等干镜NA都低于1.0。若以可见光的平均波长为0.55μm来计算,数值孔径通常在0.65的高倍镜只能分辨出距离不小于0.4μm的物体而油镜的分辨率却可达到0.2μm左右。可见显微镜的放大效能是由数值孔径决定的。 ※???? 什么是数值孔径? ? 从物理学角度来看,光学显微镜的分辨率受光的干涉现象及所用物镜性能的限制。 可表示为: 分辨率(最大可分辨距离)= ?/2

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