[所有分类]6-光学分析-分子发光DZ.ppt

激发态→基态的能量传递途径 定量分析方法 荧光分析法的应用 磷光分析法的应用 其他发光分析 装置与技术 特点 练习 判断： 1、在进行荧光分析中，为了增大灵敏度，荧光物质的浓度越大越好。 2、用350 nm的光束去激发某物质的溶液，扫描发射光谱时发现有一个强而尖锐的发射峰，中心波长在700 nm处，则可以确定该物质的荧光最大发射波长为700 nm。 3、某物质的荧光寿命为?秒，则在停止光照?秒后立即测定其磷光时将不会有荧光的干扰。 4、由于化学发光分析中常采用固定的几种试剂作为发光母体，利用其它试剂直接将其氧化或者产生的H2O2等试剂将其氧化发光，因此选择性相对较差。 选择： 1、下列关于荧光发射光谱的叙述正确的是： A、发射光谱的形状与激发光谱的波长无关； B、发射光谱和激发光谱在任何情况下都呈对称镜像关系； C、发射光谱位于激发光谱的左侧； D、发射光谱是分子的吸收光谱。 2、化学发光的仪器比荧光分析法的简单，下列部件中属于化学发光测量中的必须元件的是： A、光电倍增管； B、光栅； C、氘灯；D、氙灯 三、磷光分析 1. 磷光的特点： ? 磷光波长比荧光的长(T1S1)； ? 磷光寿命比荧光的长(磷光为禁阻跃迁产生，速率常数小)； ? 磷光寿命和强度对重原子和氧敏感(自旋轨道耦合，使kISC增加)。 2. 低温磷光（液氮） 由于磷光寿命长，T1的非辐射跃迁（内转换）几率增加，碰撞失活（振动弛豫）的几率、光化学反应几率都增加，从而降低磷光强度。因此有必要在低温下测量磷光。同时要求溶剂： ?易提纯且在分析波长区无强吸收和发射；? 低温下形成具足够粘度的透明的刚性玻璃体。 常用的溶剂：? EPA——乙醇+异戊烷+二乙醚（2+2+5） ? IEPA——CH3I+EPA（1+10）。 3. 室温磷光 低温荧光需低温实验装置且受到溶剂选择的限制，1974年后发展了室温磷光（RTP）。 1）固体基质：在室温下以固体基质（如纤维素等）吸附磷光体，增加分子刚性、减少三重态猝灭等非辐射跃迁，从而提高磷光量子效率。 2）胶束增稳：利用表面活性剂在临界浓度形成具多相性的胶束，改变磷光体的微环境、增加定向约束力，从而减小内转换和碰撞等去活化的几率，提高三重态的稳定性。利用胶束增稳、重原子效应和溶液除氧是该法的三要素。 3）敏化磷光：其过程可以简单表示为： 4. 磷光仪器 在荧光仪样品池上增加磷光配件：低温杜瓦瓶和斩光片。如右图所示。 斩光片的作用是利用其分子受激所产生的荧光与磷光的寿命不同获取磷光辐射。 转筒式 转盘式 1. 稠环芳烃分析 采取固体表面室温磷光分析法快速灵敏测定稠环芳烃和杂环化合物（致癌物质）；见表 2. 农药、生物碱、植物生长激素的分析 烟碱、降烟碱、新烟碱，2，4-D等分析 检测限0.01 ?g/cm-3 3. 药物分析和临床分析 见表 原子荧光光谱 一、定义 通过测定原子在光辐射能作用下发射的荧光强度进行定量分析的一种发射光谱分析方法。因所用仪器与AAS仪器相近。 二、特点 1）灵敏度高，检出限较低。采用高强度光源可进一步降低检出限； 2）谱线干扰少；可以做成非色散AFS； 3） 校正曲线范围宽(3-5个数量级)； 4）易制成多道仪器---多元素同时测定； 5）荧光猝灭效应、复杂基体效应等可使测定灵敏度降低； 6）散射光干扰； 7）可测量的元素不多，应用不广泛 三、基本原理 1. 荧光的产生 气态原子吸收光源的特征辐射后，原子外层电子跃迁到激发态，然后返回到基态或较低能态，同时发射出与原激发波长相同或不同的辐射即为原子荧光，是光致二次发光。AFS本质上仍是发射光谱。 2. 荧光类型 根据能级跃迁类型，原子荧光可分为：共振荧光和非共振荧光 i）共振荧光：发射的荧光波长等于激发的荧光波长。 1 0 2 1 0 2 共振荧光 热助共振荧光 ii）非共振荧光 a）直跃荧光：从激发态直接跃迁至高于基态的亚稳态或基态所发射的荧光。 1 0 2 1 0 2 1 0 2 1 0 2 Stokes (?F?E) Anti-Stokes (?F?E) b）阶跃荧光：受激发的气态原子先以非辐射形式失去部分能量回到较低激发态或者受激原子获得非辐射能后再直接回到较低激发态所发射的荧光。 1 0 2 1 0 3 2 1 0 3 2 1 0 3 2 1 0 3 2 Stokes Stokes Stokes 或Anti-stokes Stokes 或anti-stokes