溶剂回流法提取茶多酚.doc

项目名称：溶剂回流法提取茶多酚 【工作汇报】 溶剂回流法提取茶多酚 操作者姓名： 王岚 班级 生物技术102 专业 生物技术 前言 1、实训的背景、目的和意义： 实训的背景： 茶多酚（Tea Polyphenols）是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。 茶多酚在药用方面有去多功能，茶多酚具有防治心血管疾病、提高人体的综合免疫能力、其它保健治疗功效和抗癌作用；茶多酚在食品防腐功效上夜祈祷很好的作用。 实训目的和意义： 学习掌握用溶剂回流法提取茶多酚的技术。 对比于索氏提取的区别 2、实训要解决的问题： 怎样保持一定的浸出速率（必须更新溶剂以替换已近饱和的浸液）？ 有效成份提取率 因为采用了高效的连续逆流提取工艺，浓度梯度大、有效成分提尽率大；用溶剂回流提取法有效成份提取率可提高10%～30%(对比实验数据分析)。 与索式提取法相比哪个方法好？ 回流提取法通过冷凝装置，回流溶剂，节约溶剂用量，而且回流提取的材料用量少些 乙醇提取茶多酚与水提取茶多酚有什么区别？ 索氏提取和一般回流的过程，一般的回流只是为了防止液体挥发，回流下来的液体都直接回到瓶内继续加热了；而索氏提取回流下来的液体会先集中到样品室置里面，便于回收，然后到一定量后，通过虹吸作用再回流到下面的瓶里面继续加热。这样，如果测脂肪的话，开始的时候，样品室里面的乙醚或者石油醚会对样品有浸泡作用，在之后的回收过程中，因为样品的脂肪没有了，所以样品室中的乙醚就是挥发出来的纯乙醚了，就可以回收乙醚，防止污染空气与浪费，而提取出来的油脂则在下面的回流瓶里面，蒸干后通过差值测得脂肪的质量，便于脂肪含量的计算。 怎样检测茶多酚？哪个方法好？ 可参考GB/T 8313-2008 3、实训操作关键技能 （1）茶叶与乙醇加入圆底烧瓶的次序，建议先适当预热乙醇，倒出1/15体积后再投入茶叶。 提取装置整体搭建美观，安装顺序从下往上，若水龙头不多，可用乳胶管在冷凝管中封满凉水冷凝。 回流提取时间从提取溶剂沸腾回流开始计时。 第二次加入乙醇体积不用再按液固比为12:1（ml/g)b比例，滤出多少补充多少，但务必尽量滤尽。 过滤好趁热进行，量取体积等到滤液冷却后。 （6）按顺序拆除实验器具，洁净并放回原处，茶渣丢进垃圾桶。 材料及方法 实训材料及配制、预处理技术 （1）茶多酚的提取 实训材料准备：碾碎的绿茶、乙醇、恒温电热套、圆底烧瓶（磨口）、球形冷凝器、铁架台、酒精计、漏斗、滤布、烧杯、量筒、玻璃等。 配置：乙醇溶液的配置 预处理：将茶叶粉碎（不要粉的很碎，会影响提取效率） （2）茶多酚的测定 材料：分光光度仪、蒸馏水、酒石酸亚铁溶液、缓冲溶液ph=7.5 配置： ①1/15M的Na2HPO4溶液：称取Na2HPO4.2H2O 11.876 克，加水溶解并稀释至1 L。 ②1/15M的KH2PO4溶液：称取经110℃ 烘干2 h的KH2PO4 9.078克，加水溶解并稀释至1 L。 ③取溶液（1）85 ml和溶液（2）15 ml混匀。 预处理：将分光光度计打开，设置波长为540nm，预热20分钟。 2、实验技术流程路线： （1）秤取茶叶50克－→揉碎－→放到圆底烧瓶中－→加入240ml乙醇－→在恒温水浴中回流提取45分钟－→趁热过滤－→将滤渣放回到圆底烧瓶，加入等滤液体积的65%乙醇－→恒温回流提取30分钟－→趁热过滤－→合并滤液－→冷却后量体积－→标识贮藏备用 （2）吸取样液1ml－→25ml容量瓶－→4ml蒸馏水－→5ml酒石酸亚铁（充分混合）－→加ph7.5的缓冲溶液至刻度－→10mm比色皿，在波长540nm处，以空白溶液作对照，测定吸光度（A） 计算：茶多酚%＝(A*1.957*2)÷1000×[L1÷﹙L2×M0×m）]×100 L1-----测量总量 L2---测定时的用液量 M0-----试样的质量 m----试样干物质质量 A-----吸光度 1.957----用10nm比色杯，当A=0.5时，每毫升茶多酚相当于1.957 结果与分析 1、实验结果： 吸光度：（1）A1=0.246 A2=0.293 A3=0.294 A平均=0.2078 茶多酚%=﹙0.278×1.957×2﹚／1000×﹙268／0·04×20.1×95%﹚≈38.1% 2、实验结果分析： 实验成功，最佳吸光度是在0.2---o.8之间，我们所测得的最终吸光度分别为0.2078,在最佳吸光度值之间。 3、讨论及建议： ①、我们此次采用溶剂回流提取装置提取茶多酚，其好处在于回流提取法是用乙醇等易挥