电泳技术electrophoresiselectrophoresis-昆明医科大学.PDF

电泳技术 电泳技术 电电泳泳技技术术 (electrophoresis) (electrophoresis) ((eelleeccttrroopphhoorreessiiss)) 钟树荣 昆明医学院法医学院法医物证教研室 第一章 电泳概论 第二章 琼脂糖凝胶电泳 第三章 聚丙烯酰胺凝胶电泳 第四章 高效毛细管电泳 第一章 电泳概论 一、电泳的定义 二、电泳技术发展简史 三、电泳的原理 四、电泳装置 五、电泳的分类 一、电泳的定义 electrophoresis 电泳（electrophoresis）是指在电解质溶液中，带电颗 eelleeccttrroopphhoorreessiiss 粒在外加电场的作用下，以不同的速度向着与其电荷相反的 电极移动的现象。 许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核 苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值 pH ppHH 下可以带正电荷或负电荷。利用电泳现象对某些化学或生物 物质进行分离、分析或提纯的方法和技术叫电泳技术。 二、电泳技术发展简史 � 1809年俄国物理学家Рейсе首次发现电泳现象。 � 1909年Michaelis首次将胶体离子在电场中的移动称为电泳。 � 1937年瑞典Uppsala大学的Tiselius创造了Tiselius电泳仪，并首 次证明了血清是由白蛋白及α、β、γ球蛋白组成的。为此， Tiselius于1948年获得诺贝尔化学奖。 � 1948年Wieland和Fischer重新发展了以滤纸作为支持介质的电泳 方法。 � 20世纪50年代，开创了利用各种固体物质作为支持介质的区带电 泳方法。 � 1959年Raymond和Weintraub利用人工合成的凝胶作为支持介质， 创建了聚丙烯酰胺凝胶电泳。 � 1981年，Jorgenson和Luckas，创建了毛细管电泳技术。随后毛细 管电泳技术迅速发展成为可与GC、HPLC相媲美的崭新的分离分析 技术——高效毛细管电泳。 三、电泳的原理 1. 1. 11.. 以生物大分子为例阐明电荷来源： 蛋白质是两性电解质，它在水溶液中，氨基是质子供 体，起类似酸的作用；羧基则是质子受体，起类似碱的作 用。在一定的pH下，蛋白质分子所带的正电荷与负电荷数 pH ppHH 目相等，也就是蛋白质的净电荷为零，此时的pH就叫做蛋 pH ppHH 白质的等电点，用 表示。当溶液的 时，蛋白质带净 pI pHpI pI