DP334干血斑基因组DNA提取试剂盒操作指引-天根生化科技.PDF

（DP334）干血斑基因组 DNA提取试剂盒操作指南 ——干血斑 天根生化科技（北京）有限公司 版本号 实验准备 1. 干血斑打孔器 （3 mm） 2. 无水乙醇 3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl，200 μl ，1ml） 4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机 实验准备-试剂盒准备 使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。 Step 1 取三片3 mm的样品到1.5 ml的离心管中。 Step2 加入200 µl的缓冲液GA。 Step 3 加入20 µl 涡旋震荡10 sec 56℃孵育1 h Proteinase K溶液 混匀 期间每10 min涡旋10 sec Step 4 加入200 µl的缓冲液GB，震 70℃孵育10 min，期间每3 min涡旋10 荡10 sec充分混匀 sec 。孵育结束后简短离心以去除管盖内 壁的液滴。 Step 5 加入100 µl的无水乙醇。如果室温 超过25℃，请将乙醇置冰上预冷。 轻轻颠倒混匀样品，室温放置5 min， 简短离心以去除管盖内壁的液滴。 Step 6 将上一步所得溶液都加到一个吸附柱CR2中（吸附柱放入收集管中）， 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec，弃废液，将吸附柱CR2放回收集管中。 Step 7 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec，弃废液， 将吸附柱CR2放回收集管中。。 向吸附柱CR2中加入500 µl缓冲液GD （使用前请先检查是否已加入无水乙醇）， Step 8 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec，弃废液， 将吸附柱CR2放回收集管中。 向吸附柱CR2中加入700 µl 漂洗液PW （使用前请先检查是否已加入无水乙醇） Step 9 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec，弃废液。 向吸附柱CR2中加入500 µl 漂洗液PW （使用前请先检查是否已加入无水乙醇） Step 10 将吸附柱CR2放回废液收集管中，12,000 rpm 吸附柱CR2室温放置2-5 min (~13,400 ×g)离心2 min ，倒掉废液。 彻底晾干吸附材料中残余的 漂洗液。 注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。