专题2.3 分解纤维素的微生物的分离（课件）-2017-2018学年高二生物同步精品课堂（提升版）（选修1）.ppt

分解纤维素的微生物的分离 选修1专题2课题3 1．纤维素 含________三种元素，是一种多糖。纤维素的基本组成单位是________，人体内没有________，所以人体不能直接以纤维素为能源物质，但土壤中有分解纤维素的微生物，最终把纤维素分解成________释放到无机环境。 栏目链接 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 　 　 一、基础知识 （一）纤维素与纤维素酶 C、H、O　 葡萄糖 纤维素酶 葡萄糖 2.纤维素酶 纤维素 C1酶 Cx酶 纤维二糖 葡萄糖苷酶 葡萄糖 （二）纤维素分解菌的筛选 1.方法： 刚果红染色法 通过________反应直接筛选。 颜色 刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后，红色复合物无法形成，出现以_____________为中心的________，我们可以通过______________来筛选纤维素分解菌。 2.原理 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 四种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈 【方法点拨】 刚果红染色法 方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应。 方法二：在倒平板时就加入刚果红。 染色法 优点 缺点 方法一 方法二 颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作繁琐；刚果红会使菌落之间发生混杂 操作简便；不存在菌落混杂问题 产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。 【典型例题】 纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。回答下列问题： (1)在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于(　　) A．③　　　B．①② C．②③ D．①②③ (2)乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，与分离醋酸菌相比，进行培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是______________________，该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目________。 刚果红　 A 保证无氧环境 小 【变式训练】 下列有关“分解纤维素的微生物的分离”实验几种说法中，正确的是（ ） A. 纤维素酶中C1酶和葡萄糖苷酶都能将纤维素分解成纤维二糖 B. 选择培养基应以纤维素为唯一碳源，得先培养微生物，再加入刚果红 C. 应先通过固体选择培养基增加纤维素分解菌的浓度，以保证筛选效果 D. 菌落上的透明圈不一定是能分解纤维素的微生物所形成 D 二、实验设计 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 尿素分解菌的分离实验流程是将土样制成的菌悬液直接涂布在选择培养基上； 本课题通过选择培养使细菌增殖后，再涂布在鉴别培养基上。其它操作基本相同。 具体操作： 将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 1.制备鉴别培养基: 鉴别纤维素分解菌的培养基 CMC-Na 5-10g 酵母膏 1g KH2PO4 0.25g 琼脂 15g 土豆汁 100ml 将上述物质溶解后,用 蒸馏水定容到1000ml 2.涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上，30℃倒置培养。 挑选产生透明圈的菌落 挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 透明圈 无透明圈 接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在30℃－37℃培养，可获得纯培养。 【典型例题】 某些农作物秸秆富含纤维素，纤维素经过水解可以形成葡萄糖，葡萄糖再经过发酵可以生产酒精。如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程，请回答下列问题： 农作物秸秆含有丰富的纤维素，纤维素可以经过纤维素分解菌分解成葡萄糖。人们常常从土壤中分离纤维素分解菌。筛选纤维素分解菌常用的方法是__________________。其实验流程是：土壤取样→选择培养→________→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生__________的菌落。 刚果红染色法 梯度稀释 透明圈 【变式训练】 下面从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤，正确的是(　　) ①土壤取样 ②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1 mL进行平板涂布 ④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107