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基因工程原理—01244 一、名词解释 1.基因：是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。 2.基因工程：是指利用重组技术，在体外通过人丁“剪切”和“拼接”等方法，对各种生物的核酸（基因）进行改造和重新组合，然后导人微生物或真核细胞内进行无性繁殖，使重组基因在细胞内表达，产生出人类需要的基因产物，或者改造、创造新的生物类型。 3.顺反子：基因作为一个遗传功能单位，它所对应的一段核苷酸序列被称为顺反子。一个顺反子编码一条完整的多肽链，因此，顺反子是一个功能单位。 4.启动子：是位于基冈5’端上游紧靠转录起点的一段非编码序列，其功能是引导RNA聚合酶与基陶相应部位的正确结合，启动基㈨的转录。 5.外显子与内含子：被分隔开的编码序列称为外显子，是在基因内编码蛋白质的DNA片断；在编码序列之间的序列称为内含子，是在基因内不编码蛋白质的DNA片断。 6操纵子：原核生物中，功能相关的基因常串联在一起，构成信息区，与其上游的调控序列共同组成一个转录单位——操纵子。 7.增强子：增强子是一段DNA序列，其中含有多个能被反式作用因子识别与结合的顺式作用元件。反式作州因子与这些元件结合后能够，调控（通常为增强）邻近基田的转录。 8.基因组：在特定的细胞或生物体中，一套完整单倍体的遗传物质的总和称为基因组。 9.信号肽：约南I5 -30个疏水氨基酸残基组成，其特点为疏水性。它的作用是使蛋白质从内质网膜进入高尔基体。 10.聚合酶链式反应：是指在引物存在的条件下、以DNA为模板、南DNA聚合酶催化的对特定基因或DNA序列进行体外快速扩增的反应，故又称为基因的体外扩增法。 11.双链DNA的熔解温度：加热可以打开DNA双链结构，当一半分子为单链而另外一半分子仍处于双链状态时的温度称为该双链DNA的熔解温度，即Tm。 12.核酸分子探针：是指特定的已知核酸片段，能与互补核酸序列邀火杂交，蹦此可以刚于待测核酸样品巾特定基因顺序的探测。 13.膜上印迹杂交：是指将待测核酸序列片段结合到一定的固相支持物上，然后与存在于液相巾标记的核酸探针进行杂交的过程，也称印迹技术（或方法）。 14.核酸酶：是一类能够水解相邻两个核苷酸残基间的磷酸二酯键，使核酸分子断裂的一种酶。 15.黏性末端：DNA两条链上的断裂位置不在同一碱基对处，而是交错地切开，这样会形成黏性末端。 16.同裂酶：来源不同，但识别的是相同的核苷酸靶序列，切割DNA链后可以形成相同末端的一类酶则称为同裂酶（也称同功异源酶）。 17.质粒：是存在于细胞质巾的一类独立于染色体外的可自主复制的遗传成分，绝大多数质粒为共价闭合环状DNA(cccDNA)，少数是线性。 18.溶菌周期：噬菌体吸附到寄主细胞表面之后，注入DNA，噬菌体的DNA进行复制及蛋白质的合成，并组装成噬菌体颗粒，最后使寄主细胞裂解，释放出子代噬菌体颗粒。 19.cos位点：λ噬菌体DNA是一条线性双链DNA分子，长度为485021)p。在其两端的5＇末端各带有一个长为12个碱基的单链互补黏性末端。一旦进入宿主细胞，黏性末端互补配对形成双链环状DNA，这种由黏性末端结合形成的双链Ⅸ段称为cos位点 20.转染：重组体DNA分子直接感染大肠杆菌，使之侵入寄主细胞内。这种南寄主细胞捕获噬菌体（病毒）DNA的过程为转染。 21.穿梭载体：是指可以在两种截然不同的生物细胞中复制的载体，含有不止一-个ori、能携带插人序列在不同种类宿主中繁殖，在原核生物和真核生物细胞中都能复制和表达。 22.目的基因：基因丁程主要是通过人丁的方法分离、改造、扩增并表达生物的特定基因，从而深入开展核酸遗传研究或者获取有价值的基因产物。通常将那些已被或者准备要被分离、改造、扩增或表达的特定基因或DNA片段称为目的基因。 23.基因组文库：某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体储存于某一受体菌的群体中，这个群体就称为该生物基因组的文库。 24.cDNA文库：以mRNA为模板，在体外经逆转录酶催化反转录生成cDNA，与适当载体连接后转化受体菌并繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。 25.定点诱变：取代、捅入或缺失克隆基因或DNA序列中的任何一个特定的碱基，这种体外特异性改变某个碱基的技术叫作定点诱变。 26.感受态细胞：受体细胞经过一些特殊方法（如电击法、CaCI2、RhCl等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。 27.核糖体结合位点：是指紧靠启动子下游，从转录起始位点开始延伸几十个碱基长度的一段序列，翻译起始密码子AUG通常位于它的巾心位置，是核糖体RNA识別与结合的位点，在原核生物巾义被称为SD序列。 28.密码子偏