微生物的实验室培养(选修).ppt

课题1　微生物的实验室培养 课程标准 进行微生物的分离和培养。 课标解读 1.知道培养基的基础知识，进行无菌技术的操作。 2.进行微生物培养。 1．培养基 (1)培养基概念 按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养基质。 (2)培养基种类 包括 培养基和 培养基等。 (3)培养基的化学成分 一般都含有 、 、 和 四类营养成分。还需要满足微生物生长对 、 及 等的要求。 2．无菌技术 (1)无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下四个方面 ①对实验操作的 、操作者的 ，进行清洁和 ； ②将用于微生物培养的器皿、 和 等进行 ； ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行； ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。 (2)消毒和灭菌 ①消毒：消毒是指使用 方法仅杀死物体表面或内部一部分 的微生物， (包括；不包括)芽孢和孢子，常用的方法有 消毒法、 消毒法、 消毒法。 ②灭菌：灭菌是指使用 杀死物体内外 ， (包括，不包括)芽孢和孢子，常用的方法有 灭菌、 ＿＿＿灭菌和 灭菌。 [思维激活1] 用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌？70%与95%的酒精，哪一种效果更好？为什么？ 提示　酒精擦拭属化学消毒，酒精消毒时，70%的酒精杀菌效果最好。原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。 1．碳源、氮源及生长因子的来源与功能归纳 特别提示　(1)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。 (2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机物既是碳源，又是氮源、能源。 (3)大凡对生长因子不能合成或合成能力有限的微生物，其培养基中均需额外添加生长因子，而许多微生物能自行合成生长因子，其培养基中不需再添加。 2.培养基类型划分 【巩固1】 下列培养基配方中能作为选择培养基、鉴别培养基的依次是 (　　)。 A.①③ B．②① C．②④ D．③① 解析　高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可以将金黄色葡萄球菌分离出来，有高浓度食盐的培养基为选择培养基。在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌，有伊红和美蓝的培养基为鉴别培养基。 答案　D 3.无菌技术 (1)消毒和灭菌的区别 (2)无菌技术主要操作要求 ①实验前应对操作空间、操作人员消毒，对所用器具和培养基灭菌。 ②实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作，另外要避免已灭菌处理材料再次污染。 2．请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 (1)培养细菌用的培养基与培养皿。 (2)玻璃试管、烧瓶和吸管。 (3)实验操作者的双手。 解析　消毒和灭菌是无菌技术的两项基本技术，实践中需要根据无菌操作的对象合理地选择使用。原则是既要考虑使用的效果，又要考虑无菌操作对象的承受能力。 答案　(1)、(2)需要灭菌；(3)需要消毒。 【例2】 培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是 (　　)。 ①化学消毒　②灼烧灭菌　③干热灭菌　④紫外线灭菌　⑤高压蒸汽灭菌　⑥巴氏消毒法 A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤ 深度剖析　培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。 答案　A 1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：