1、色谱分析概论.pptx

一、色谱分析概论;图示;; 色谱法定义、实质和目的;2．按固定相的固定方式分：;色谱法的特点;反相分配色谱 极性:固定相 流动相 固定相 - 非极性 流动相(甲醇, 乙腈）- 极性 非极性物质后出峰;所谓正相，就是固定相极性大于流动相极性；反相，就是固定相极性小于流动相极性。 对于气相色谱来说，基本都是正相体系。因为载气都是氮气之类的非极性物质。 对于液相，才有正相反相一说。如C18柱一般极性小于常用的甲醇水等流动相的极性，故称为为反相体系，反相体系在液相里应用比较多。如果是硅胶柱，采用正己烷之类的做流动相，固定相极性大于流动相极性，那就是正相体系。 正相和反相的区别主要指是填料(固定相)的不同。 正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。;1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。 由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。;2、反向色谱 反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。 常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等;气相色谱的基本术语;(1)峰高(h)　峰高指峰顶到基线的距离，用h表示。(2)峰面积(A)　指每个组分的流出曲线与基线间所包围的面积，用A表示。;(1)标准偏差(σ)　指0.607倍峰高处色谱峰宽度(见图1-1中EF段)的一半，用σ表示。(2)半峰宽(W1/2)　指峰高一半处色谱峰的宽度(见图1-1中GH段)，以W1/2表示。;5、保留时间tR：从进样开始到某组分色谱峰顶（浓度极大点）的时间，即组分在色谱柱中的停留时??或组分流经色谱柱所需要的时间。 6、死时间t0或tm：从进样开始到惰性组分(指不被固定相吸附或溶解的空气或甲烷)从柱中流出，呈现浓度极大值时所需要的时间称为死时间（又称流动相保留时间）。分配系数为零的组分的保留时间。 7、调整保留时间tR′扣除死时间后的保留时间称为调整保留时间，以tR′表示。;续前;(1)理论塔板数n：塔板理论是从实践中总结出来的一种半经验理论，它把色谱柱比作一个精馏塔，假设柱中有许多塔板，组分在每个塔板气相和液相间进行分配并达到分配平衡，然后都随着流动相按一个一个塔板的方式向前转移。;(2)有效理论塔板数n有效：在实际应用中，常常出现计算出的n很大，但色谱柱的实际分离效能并不高的现象。;仪器