2011年高三生物一轮相关复习精品课件：选修1专题5、6 DNA蛋白质技术.ppt

必威体育精装版考纲; 一、多聚酶链式反应扩增DNA片段 1．细胞内DNA复制与PCR技术的比较;;2.PCR的反应过程 一般要经历三十多次循环，每次循环可分为变性→复性→延伸三步。 3．PCR技术反应过程中控制不同温度的意义 (1)90 ℃以上时变性，双链DNA解聚为单链； (2)50 ℃左右时复性，两种引物与两条单链DNA结合； (3)72 ℃左右时延伸，TaqDNA 聚合酶促使DNA新链的合成。; 1．多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般要经历30多次下述循环：95 ℃条件下使模板DNA变性、解链→55 ℃条件下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃条件下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述，不正确的是 (　　) A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的;C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比，其所需要酶的最适温度较高;【解析】　PCR一般要经历30多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸。DNA变性(90～96 ℃)：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA。复性(25～65 ℃)：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。延伸(70～75 ℃)：在Taq酶(在72 ℃左右活性最高)的作用下，以dNTP为原料，从引物的5′端向3′端延伸，合成与模板链互补的DNA链。 【答案】　C;2．方法目的; (1)哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。 (2)实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。; 2．(2010年青岛模拟)下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是 (　　) A．氯化钠的浓度越低，DNA的溶解度越大 B．人的血液不可代替鸡血进行该实验 C．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂 D．利用DNA易溶于酒精的特点可除去DNA中的部分杂质;【解析】　人是高等哺乳动物，其成熟的红细胞中没有细胞核不能进行该实验。A项NaCl溶液浓度在小于0.14 mol/L时，溶液的浓度越低，对DNA的溶解度越大是正确的，没有前提条件这种说法是错误的；柠檬酸钠的作用是抗凝血；DNA不能溶于酒精中，所以B项是对的。 【答案】　B;3．向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是 (　　) A．减小；减小　　　　　 B．增大；增大 C．先减小后增大；增大 D．减小；增大;【解析】　DNA在NaCl溶液中的溶解情况如右图所示：在向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水时，DNA的溶解度先减少后增大，而蛋白质在高浓度盐溶液中会沉淀，随盐浓度的降低，蛋白质的溶解度升高。 【答案】　C ;三、血红蛋白的提取和分离 1．方法及原理;2.实验操作程序 (1)样品处理 ①红细胞的洗涤：除去血浆蛋白等杂质，以利于后续步骤的分离纯化； ②血红蛋白的释放：使红细胞涨破，血红蛋白释放出来； ③分离血红蛋白溶液：经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来，便于下一步对血红蛋白的纯化。;(2)粗分离——透析：除去样品中相对分子量较小的杂质。 (3)纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。 (4)纯度鉴定：一般用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法来测定蛋白质的分子量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。; 相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，而相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，移动速度快，因此蛋白质分子彼此分离。; 4．(2009年南京质检)下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是 (　　) A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离 D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动;【解析】　带电离子或分子在电场中向着与其所带电荷相反的电极移动。 【答案】　D;四、五种物质的提取方法、原理及步骤;提取物质;提取物质; 水中蒸馏、水上蒸馏、水汽蒸馏的区别： (1)这三种方法的基本原理相同，但原料放置位置不同。 (2)水中蒸馏：原料放在蒸馏容器的水中，水要完全浸没原料。 (3)水上蒸馏：容器中水的上方有筛