【优化方案】(浙江专用)高考生物二轮相关复习 专题八 现代生物科技专题 第1讲 基因工程和克隆技术课件.ppt

命题点2　克隆技术 流动性 获能 减数第二次分裂中期 促性腺激素　 细胞壁 纤维素酶和果胶 离心、振动、电刺激 形成了新的细胞壁 植物组织培养 生长素 杂交瘤 特异性抗体 选择 3 核心知识 提炼整合 高频命题 互动突破 专题强 化训练 栏目导引 专题八　现代生物科技专题 第1讲　基因工程和克隆技术 专题八　现代生物科技专题 2016高考导航 专题八　现代生物科技专题 考纲要求 高考印证 2013年 2014年 2015年 1．基因工程 (1)基因工程的诞生(Ⅰ) (2)基因工程的原理及技术(Ⅱ) T32(4) (3)基因工程的应用(Ⅰ) T32(5) T18(1) 2．克隆技术 (1)植物的克隆(Ⅰ) T32(3) T18(1) (2)(3) (2)动物的克隆(Ⅰ) T6 T3 专题八　现代生物科技专题 备考策略 1.命题趋势：(1)多以必威体育精装版基因工程研究成果为载体，考查基因工程的工具与操作程序。(2)以工农业生产、畜牧业生产和医学实践中的具体事例为命题背景，考查克隆技术相关知识。 2．备考指南：(1)表解比较法理解限制酶、DNA连接酶和载体的作用。(2)实例分析法理解基因工程的原理与过 程。(3)列表比较法理解两个不同：植物组织培养和动物细胞培养的不同、植物体细胞杂交与动物细胞融合的不同。(4)图解法理解单克隆抗体的制备过程。 1．基因工程的工具 (1)限制性核酸内切酶 ①来源：主要从原核生物中分离纯化出来。 ②作用 a．__________________________________________________ b．________________________________ ③结果：产生____________。 特异性识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列。 切割两个核苷酸之间的化学键。 粘性末端 (2)DNA连接酶 作用：将具有________________的两个DNA片段连接在一起。 (3)质粒 ①从存在位置看——在细菌中独立于拟核之外。 ②从化学成分上看——为双链环状DNA分子。 ③从功能上看——能自主复制。 ④从结构上看——常含有抗生素抗性基因。 相同粘性末端 方法 具体操作 直接分离 从自然界已有的物种中分离，如从__________中获取 人 工 合 成 化学合成 已知核苷酸序列的__________，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板 基因文库 较小基因 方法 具体操作 人 工 合 成 反转录法 以RNA为模板，在____________作用下人工合成 PCR技术扩增 目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在耐热的DNA聚合酶 作用下延伸 逆转录酶 (3)将目的基因导入受体细胞 项目 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用 方法 ________________法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射 技术 感受态细胞 法(用_____处理) 受体 细胞 受精卵、体细胞 受精卵 常用大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌等 农杆菌转化 Ca2＋ (4)筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达 ①筛选：用含__________的培养基培养受体细胞，选择含____________的受体细胞。 ②表达：目的基因在宿主细胞内表达产生人们需要的____________。 抗生素 重组质粒 功能物质 3．几种重要的克隆技术分析 (1)植物细胞培养、器官培养和原生质体培养的关系 愈伤组织 器官 单个细胞 除去细胞壁 机械消化或胰蛋白酶消化 原代 传代 细胞系 单个细胞 血清 滋养细胞 仙台病毒或聚乙二醇 (5)动物的克隆繁殖 命题点1　基因工程及转基因技术的安全性 目的基因的获取 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 农杆菌转化法 细胞质 染色体DNA T-DNA片段(内部) 植物组织培养 粘性 磷酸二酯键 1．目的基因应插入启动子与终止子之间的部位。 2．将目的基因导入受体细胞没有碱基互补配对现象。 3．原核生物作为受体细胞的优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。 4．一般情况下，用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段，但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因，以避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接。 5．标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞。 6．受体细胞常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物(大肠杆菌、酵母菌)等。 7．启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA)；终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。 限制酶 DNA连接酶 Ca2＋　 感受 重组质粒和感受态细胞 脱分化 再分化 卡那霉素 显微注射 动物体细胞的全能性一般不能表现 性别鉴定 逆转录 限制酶 BamHⅠ和Pst