【绿色凯尔系列丛书】高中生物新课标选修三教材: (专题1 基因工程).ppt

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【绿色凯尔系列丛书】高中生物新课标选修三教材: (专题1 基因工程).ppt

① 概念:PCR全称为_______________,是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ③条件:_______________________、 _______________、___________ (做启动子)、 ___________.前提条件: ②原理:__________ ④方式:以_____方式扩增,即____(n为扩增循 环的次数) ⑤结果: 选修1 P60 聚合酶链式反应 体外 特定DNA片段 DNA复制 已知基因的核苷酸序列 四种脱氧核苷酸 一对引物 DNA聚合酶 指数 2n 使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增 (二)利用PCR技术扩增目的基因 ⑥过程: a、DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板 在热作用下,_____断裂,形成___________ b、退火(复性25℃-65℃):系统温度降低,引 物与DNA模板结合,形成局部________。 c、延伸(70℃-75℃):在Taq酶的作用下,从 引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补 的________。 氢键 单链DNA 双链 DNA链 1.用一定的_________切割 质粒,使其出现一个切 口,露出____________。 2.用_____________切断目 的基因,使其产生_____ ____________。 (二)基因表达载体的构建 —— 核心 3.将切下的目的基因片段插入质粒的______处, 再加入适量___________,形成了一个重组 DNA分子(重组质粒) 限制酶 黏性末端 同一种限制酶 的黏性末端 切口 DNA连接酶 相同 选修三生物 基因工程 绿色凯尔 高二年级 生物 专题1-1 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。 抗虫棉 抗虫棉 DNA重组技术的基本工具 准确切割DNA的工具(“分子手术刀”) DNA片段的连接工具(“分子缝合针”) 基因转移工具(“分子运输车”) 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要从原核生物中分离纯化出来,能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶。 4000种。 1、来源: 2、种类: 3、作用: 4、结果: 形成两种末端 一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 黏性末端 平末端 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 重播 DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点? 二、DNA连接酶——“分子缝合针” 限制酶切割后有两种不同的结果,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,所用DNA连接酶是否可以不加选择? E.coliDNA连接酶:连接黏性末端 T4DNA连接酶:连接黏性末端和平末端 三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 如果载体对受体细胞有害将怎样? 假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样? 作为载体没有切割位点将怎样? 目的基因是否进入受体细胞,你如何察觉? 作为载体的必要条件 能自我复制 有切割位点 能与目的基因结合 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达; 有遗传标记基因 对受体细胞无害 比较容易得到 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因的存在,将来可用含青霉素的培养基鉴别。 大肠杆菌及质粒载体结构模式图 1.2 基因工程的基本操作程序 补:原核细胞的基因结构 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 与RNA聚合酶结合位点 启动子 终止子 RNA聚合酶能够识别调控序列中的结合位点,并与其结合。 转录开始后,RNA聚合酶沿DNA分子移动,并以DNA分子的一条链为模板合成RNA。 转录完毕后,RNA链释放出来,紧接着RNA聚合酶也从DNA模板链上脱落下来。 ①不能转录为信使RNA,不能 编码蛋白质。 :能转录相应的信使RNA,能 编码蛋白质 编码区 非编码区 原核细胞的 基因结构 ②有调控遗传信息表达的核 苷酸序列,在该序列中, 最重要的是位于编码区上 游的RNA聚合酶结合位点。 启动子 补:真核细胞的基因结构 编码区 非编码区 非编码区 与RNA聚合酶 结合位点 内含子 外显子 能够编码蛋白质的序列叫做外显子 不能够编码蛋白质的序列叫做内含

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