【走向高考】2017年高考生物一轮相关复习 现代生物科技专题 第1讲 基因工程课件 新人教版选修3.ppt

解析　本题中培育转基因水稻的目的是培育出铁含量比普通大米高的水稻，因此目的基因为铁结合蛋白基因，要大量获得一般采用PCR技术进行扩增。构建重组质粒要用同一种限制酶切割含目的基因的DNA片段和质粒。将外植体培养成试管苗的过程要用到不同的培养基，培养基最明显的差别在于所添加激素的种类和比例的不同。培育转基因水稻的目的是获得铁含量较高的大米，因此检测时应看转基因水稻种子中铁的含量。 答案　(1)目的基因　PCR　(2)含目的基因的DNA片段　质粒　CaCl2　(3)含有重组质粒的愈伤组织　生长素和细胞分裂素的浓度比例不同　(4)种子中铁的含量 (3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即__________DNA连接酶和__________DNA连接酶。 (4)反转录作用的模板是__________，产物是__________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用__________技术。 (5)基因工程中除质粒外，______和______也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是______________________。 答案　(1)黏性末端　平末端 (2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (3)大肠杆菌　T4 (4)mRNA(或RNA)　cDNA(或DNA)　PCR (5)λ－噬菌体的衍生物　动植物病毒 (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 解析　(1)DNA分子经限制性内切酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即黏性末端和平末端。(2)若用不同的酶切割目的基因，形成的末端一定要与EcoR I切割运载体产生的末端相同，这样才能相互互补连接。(3)根据酶的来源，可将DNA连接酶分为大肠杆菌DNA连接酶和T4DNA连接酶两类。(4)以mRNA为模板，合成互补的DNA，称为反转录；通过PCR技术，可以在短时间内大量扩增目的基因。(5)基因工程中常用的运载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等。(6)大肠杆菌细胞外有细胞壁和细胞膜，能阻止其他物质的进入，只能通过Ca2＋处理细胞，使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。 考 点 突 破 1．基因工程的理论基础 基因工程的操作工具 2．基因工程的工具酶 (1)几种酶的比较 比较 项目 限制酶 DNA连 接酶 DNA 聚合酶 解旋酶 DNA (水解)酶 作用 底物 DNA 分子 DNA分 子片段 脱氧核 苷酸 DNA分子 DNA分子 作用 部位 磷酸二 酯键 磷酸二 酯键 磷酸二 酯键 碱基对间 的氢键 磷酸二 酯键 作用 结果 产生黏性末端或平末端 形成重组DNA分子 形成新的DNA分子 形成单链DNA分子 形成游离的脱氧核苷酸 (3)作为载体的条件 条件 适应性 稳定并能复制 目的基因稳定存在且数量可扩大 有一个至多个限制酶切割位点 可携带多个或多种外源基因 具有特殊的标记基因 便于重组DNA的鉴定和选择 [高考警示]　关于工具酶的五个注意点 (1)限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。 (2)为使目的基因与载体形成相同的DNA片段末端连接，通常使用同一种限制酶将二者切割，但如果不同的限制酶切割DNA分子所产生的末端也存在互补关系时，则两末端也可连接。 (3)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 (4)限制酶是一类酶，而不是一种酶。 (5)DNA连接酶起作用时，不需要模板。 A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体 解析　解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向，只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移动方向才一定与图丙相同。 答案　D 解析　载体必须具备的条件有：①对受体细胞无害，不影响受体细胞正常的生命活动；②具有自我复制能力，或能整合到受体细胞的染色体DNA上，随染色体DNA的复制而同步复制；③具有一个至多个限制酶切点，以便目的基因可以插入到载体中；④带有特殊的标记基因，如抗生素抗性基因，以便于对外源基因是否导入进行检测；⑤载体DNA分子大小适合，以便于提取和进行体外操作。 答案　D [技巧点拨]　确定限制酶种类的两种方法 (1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类①应选择切点位于目的基