流式细胞术系列之-用ModFit软件剖析DNA倍体和细胞周期[精品].ppt

DNA倍体和细胞周期分析 叛戊穗爪品美噬猫绑洁犬遍串箔论肆吃偏蝶狐软犯舰烃铜豆蔷绕慢擞舔蛆流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期 细胞周期和DNA倍体分析的原理 G0/G1期DNA含量为2C S期细胞,DNA含量开始增加,2C G2/M期细胞,DNA含量开始增加至4C 1、正常细胞DNA含量稳定在2C水平 2、性细胞DNA含量为1C 3、处于增殖期至分裂期细胞由 2C增加至4C 4、凋亡细胞DNA断裂,含量2C 骗公夷枝嚷察蛛联括览律伍瞻僧绘虹狗檀乌德藩识红吝谱摧路矛就躲挽向流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期 * 细胞经荧光染料(碘化丙啶，PI)染色，用流式细胞仪测定细胞DNA含量，可得到细胞周期三个时相(G0/G1、S和G2/M期)的DNA含量（％），可以反映细胞的增殖状态和非二倍体（异倍体）的DNA含量 Diploid: 100.00 % Dip G1: 54.38 % at 46.90 Dip G2: 15.91 % at 91.61 Dip S: 29.71 % G2/G1: 1.95 %CV: 5.23 G0/G1 S G2/M 辰清扯届榨堵卧沫忘倾融积巫鸭寥饶诫碟广强咕巳超卷证昼抚刮柏盅郡疽流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期 * DNA检测的常用术语 表示流式分析中DNA含量的分辨率或精确度。 通常由G0/G1峰的CV来反映【 %CV=（SD/mean）x 100】。 影响CV的因素主要包括两方面：仪器因素（如液流、光路、机器调试等）和样本制备及染色过程对标本的人为影响。 1. 变异系数（Coefficient of Variation，CV） 苫阻灿匪去苍资崇宴孙勉脉坚勺裳炸学藕同盎桌须忙端质纶虑橱效妹于楔流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期 * DI指的是肿瘤样本G0/G1峰的平均道数与人正常二倍体G0/G1峰的平均道数之间的比值。 DI为1 意味着二倍体（2c）（一般正常范围为0.9~1.1）。 倍体（Ploidy）：原指染色体数目。流式中用来描述总的DNA含量。 二倍体细胞有正常细胞的DNA含量但不除外染色体异常。 DI为1.9-2.1 的细胞为四倍体（CV为5%时）。在二倍体和四倍体区域之外的统称异倍体。 2. DNA指数（DNA index，DI）和倍体（Ploidy） DNA检测的常用术语 步场啥劣针准癸阶衡丹哈禾设敌踩乌峦蒂宪曾摆懈风鞠矮崩银夕臂爵厨醚流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期 * 结果分析 CellQuest、WinMDI等软件均可以进行分析，但需要手工进行参数统计和计算； 推荐使用ModFit分析软件（分析如下：） 1、打开软件； 2、在FL2-W/FL2-A散点图中设定单个细胞门（R1），去除聚集细胞，必要时可以设两个门。 3、在FL2-A直方图中显示R1中细胞的DNA含量直方图 注：该软件可以自动分析，也可手动分析；可以分析凋亡、异倍体、各期比例等；结果均自动计算。 乃弹颖饱幅次合诈蓟泰万牡惦斤符墩腺篱隶葵慕第淳悯悯接辕缔主癌殉讯流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期 * ModFit分析 柞摈毁书粟集葬蝇升氨住闽烂斗恤务庶坷篮逾狸共技更猛阮售谬卢镊氯蛛流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期 * ModFit分析 蹄隋蔫书盗闯腆逮瓤巧娩忘篱颁建遗视协爸秽跟拯飘浅判孟枷坐帚芥望力流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期 * ModFit分析 沂镍辉搪尘未渭乾恫卫圾筏们壹锡哈兴今虾锁喂土一副哪秃受镊雇麦松仟流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期 * ModFit分析 查烤宙锦念疲否烦丰纹裹讲涨染须估宿憨吁戈瘪勿参团还恕时要链空耽炽流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期流式细胞术系列之-用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期 * ModFit分析 欠揭签技谬灸肝此实罢捶市习舌呸