北京师范大学生物化学课件 第7章节重点内容.ppt

第7章 蛋白质的分离、纯化和表征 purification and characterization 对蛋白质分子进行的各种研究，要建立在对蛋白质分子本身的性质（特别是区别于其它生物与化学分子的独特的性质）和各种实验手段的原理和适用性深入了解的基础上。 因材施法，有的放矢 蛋白质的分离、纯化和表征 蛋白质的性质 蛋白质由氨基酸组成，因此蛋白质的许多物理和化学性质与氨基酸相同或相似。 蛋白质的酸碱性质，蛋白质的等电点和等离子点。 蛋白质的亲水特性，水化层和双电层。 蛋白质的胶体性质 蛋白质的分离、纯化和表征 蛋白质的性质 蛋白质的沉淀作用，对水化层和双电层的破坏。 蛋白质的光学特性 蛋白质具有特征的紫外吸收光谱 蛋白质的浓度与吸光度成正比 蛋白质具有特征的荧光光谱 蛋白质的分离、纯化和表征 现代生物实验技术 沉淀技术 层析技术 离心技术 电泳技术 过滤技术 1。沉淀技术：中性盐沉淀反应 (盐析) 2。离心技术：分离沉淀和上清 3。过滤技术：超滤和透析 4。层析技术：凝胶过滤，离子交换层析和亲和层析的原理和应用 5。电泳技术：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和应用 6。酶联免疫吸附测定法 现代生物实验技术 蛋白质的分离、纯化和表征 蛋白质的研究 蛋白质的分离、纯化 蛋白质的性质、结构与功能研究 模块一、原料的选择、前处理和蛋白质的提取 蛋白质的分离纯化流程 模块二、蛋白质的粗纯化 模块三、蛋白质的精细纯化 模块四、成品的脱盐、浓缩、干燥和保存 蛋白质样品 分析与鉴定