第二章讲 基因工程(一).ppt

第二章 基因工程;第一章 概述;基本定义;;基本概念;基本概念;理论基础;;;One Gene, One ProteinOne Gene, One Polypeptide Chain;生命的语言;;; 140年前，Mendel在捷克莫勒温镇一个修道院里沉醉于豌豆杂交实验，也许根本就没有想到，他提出的遗传因子在半个世纪后被Johanssen定义为基因。 1910年Morgan将遗传粒子定位于染色体。 1944年Avery证明了基因的物质基础是DNA 50年代初Watson和Crick又揭示了DNA的分子结构 70年代初，DNA已可在体外被随意拼接并转回到细菌体内遗传和表达;遗传学之父; 20世纪40年代科学家发现从一种具有夹膜、致病性的肺炎球菌中提取的核酸，可使另一种无夹膜、不具致病性的球菌的遗传性状发生改变，变成有夹膜和致病性的肺炎球菌。;;;今天，人们在超市货架上可以买到保质期很长的转基因土豆，“多利”克隆绵羊走进实验室，基因工程正在使整个人类生活方式发生重大变革。 2000.6.26宣告人类基因组“工作框架图”绘制完毕。 前还有许多有价值的微生物，动物，植物的测序工作正在进行中。 /genomics/ ;生命树;;二、基因工程操作的基本过程;;基因工程的基本过程;（1）从供体细胞中分离出基因组DNA，用限制性核酸内切酶分别将外源DNA（包括外源基因或目的基因）和载体分子切开;;（3）借助于细胞转化手段将DNA重组分子导入受体细胞中；;（5）筛选和鉴定转化细胞，获得使外源基因高效表达的基因工程菌或细胞；（简称“检”）;Example：Transfer of the Insulin（胰岛素） gene into a plasmid vector;转基因植物;;;;各种PCR仪（扩增仪）;;第二节 工具酶与基因表达载体;2.2 工具酶;限制性核酸内切酶的概念; 2006年2月共发现3773种限制性内切酶，I、II、III型各有68、3692、10种，甲基化指导的3种,商品化的609种，II型中共有223种特异性。;;限制性核酸内切酶的命名原则;;;Ⅱ型限制性核酸内切酶的功能;;限制性内切酶的应用;限制性内切酶的应用;;;;II型限制性核酸内切酶酶切反应操作;Ⅱ限制性核酸内切酶的主要用途;;限制—修饰系统restriction—modification system;其它工具酶;DNA连接酶(DNA ligase);;;DNA聚合酶(DNA polymerase);;;;;反转录酶;核酸修饰酶;;核酸酶;;;3.单链核酸内切酶 S1核酸酶;