酶工程 试题及答案1_精品.doc

酶工程试题(A)一 名词解释（每题3分，共计30分） 酶工程 自杀性底物 别构酶 诱导酶 Mol催化活性 离子交换层析 固定化酶 修饰酶 非水酶学 模拟酶 二 填空题(每空1分,共计30分) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是 酶分子结构 ，二是 反应条件 。 2.求Km最常用的方法是 双倒数作图法。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是 序列机制 ，另一类是 乒乓机制 。 4.可逆抑制作用可分为 竞争性 反竞争性 非竞争性 混合性 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是 致病菌 ，二是能够利用廉价原料，发酵周期 短 ，产酶量 高 ，三是菌种不易 退化 ，四是最好选用能产生 胞外 酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用 终止 反应法和 连续 反应法。 7.酶制剂有四种类型即 液体 酶制剂， 固体 酶制剂， 固定化 酶制剂和 纯 酶制剂。 8.通常酶的固定化方法有 吸附法 共价键结合法 交联法 包埋法 9.酶分子的体外改造包括酶的 表面 修饰和 内部 修饰。 10.模拟酶的两种类型是 半合成 酶和 全合成 酶 。 11.抗体酶的制备方法有 引物 法和 拷贝 法。 三 问答题(每题10分,共计40分) 固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？ 优点（1）易将固定化酶和底物，产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺 （2）可以在较长的时间内连续使用 （3）反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化 （4）提高了酶的稳定性 （5）较能适于多酶反应 （6）酶的使用效率高 产率高 成本低 缺点 固定化时酶的活力有损失 比较适应于水溶性底物 与完整的细胞相比，不适于多酶反应。（每点一分，答满满分） 写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。 透析与超虑 离心分离 凝胶过滤 盐析 等电点沉淀 共沉淀 吸附层析 电泳 亲和层析 热变性 酸碱变性 表面变性等（写出一种方法1分）每种方法的原理叙述总计7分 为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？ 3. （1）微生物种类多，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样 （2）微生物生长繁殖快，酶易提取，特别是胞外酶 （3）来源广泛，价格便宜 微生物易得，生长周期短 可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高 可以利用以基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种 下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数。 [S](mol/L) V0(umol/min) 0.5(10-6 28 4.0(10-6 40 1.0(10-5 70 2.0(10-5 95 4.0(10-5 112 1.0(10-4 128 2.0(10-4 139 1.0(10-2 140 .最大反应速度140 Km: 1.0(10-5 酶工程试题（B） 一 名词解释 抗体酶 酶反应器 模拟酶 产物抑制 稳定pH 产酶动力学 凝胶过滤 固定化酶 非水酶学 液体发酵法 二 填空题(每空1分,共计30分) 1.Km值增加，其抑制剂属于 竞争性 抑制剂，Km不变，其抑制剂属于 非竞争性 抑制剂，Km减小，其抑制剂属于 反竞争性 抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有 液体 培养法和 固体 培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括 温度 ， pH ， 湿度 ， 通气量 ， 和 泡沫搅拌 等。 4.打破酶合成调节机制限制的方有 控制条件 ， 遗传控制 ， 其他方法 。 5.酶生物合成的模式分是 同步合成型 延续合成型 中期合成型 滞后合成型 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有 热变性 法， 酸碱变性 法和 表面变性 法 7. 通常酶的固定化方法有 包埋 法， 共价键结合 法， 吸附 法， 交联法。 8. 酶分子的体外改造包