VEGF(血管内皮生长因子)VEGF(血管内皮生长因子).ppt

05 作用于VEGF信号通路的血管生成抑制剂 直接靶向VEGF的血管生成抑制剂 VEGF单克隆抗体（贝伐单抗， 世界上首个VEGF抑制剂) 可溶性VEGFR药物（Aflibercept） VEGF的反义寡核苷酸 作用于VEGF通路中其他信号传递分子的血管生成抑制剂 VEGFR酪氨酸激酶抑制剂(索拉非尼，世界上首个用于临床的多靶点抗肿瘤药物) 缺氧诱导因子抑制剂 06 VEGF对皮肤癌发生与发展的调控 在人类皮肤癌中，鳞状细胞癌的发病率居第二位，世界上每年有500,000人发病。 DMBA/TPA（二羟甲基丁酸/对苯二甲酸）化学诱导小鼠皮肤癌，小鼠的鳞状细胞癌和人类极其相似。 肿瘤的生长过程中，VEGF能够促进血管内皮细胞增殖从而增加肿瘤的血管密度，促进肿瘤生长。 由于血管生成在皮肤鳞状细胞癌的发生发展有重要影响，由此推断，VEGF对皮肤癌的生长也有重要的促进作用。 很多肿瘤生长过程中，血管微环境能够影响肿瘤干细胞（CSC）的功能。但是VEGF是否能够直接影响CSC的增殖，尚未有明确结论。 二.VEGF对CSC的影响 以上实验已证明小鼠皮肤癌血管微环境 中存在CSC，并且现已知VEGF对血管 微环境的形成有重要影响，但VEGF对 CSC是否有直接影响尚未证实。 （一）DC101封闭性阻断VEGFR2 通过qRT-PCR、免疫荧光可以证明：VEGFR2存在于血管内皮细胞。 VEGF阻断 血管生成 减少 CSC比 例降低 阻断VEGF能通过减少血管生成使CSCs比例降低，但是VEGF是否能直接影响CSCs的某些基因的表达来直接调控其增殖尚需进一步证实。 VEGF CSC ？ （二）皮肤癌小鼠模型里敲除Vegfa基因 qRT-PCR表明VEGFa在CD34+CSCs中的表达高于正常上皮细胞和CD34-CSCs。 为了探究 CSCs 分泌的VEGF是否调控皮肤CSCs的自我更新和分化，维持肿瘤的生长，该实验在已经建立皮肤癌的小鼠模型中敲除Vegfa基因，用抗癌药三苯氧胺处理一周后，大多数肿瘤已经萎缩到原来的60%,两周后大多数肿瘤完全消失。 在癌症的治疗的过程中，单纯的血管增生抑制剂并不能使已经建立的肿瘤完全消失，而上述实验中肿瘤完全消失，表明：Vegfa可以通过除促进血管增生以外的因素影响肿瘤生长。 Vegfa基因的缺失导致 TECs（即CSCs）显著减少， 可以推断：VEGF对皮肤癌的 CSCs存在一定影响。 从CSCs对称性细胞分裂与非对称性分裂来分析这种假设是否成立，对称性细胞分裂代表细胞正在进行自我更新，非对称性分裂表明肿瘤细胞的分化。 在肿瘤生长的过程中，大约40%的TEC处于对称性分裂（自我更新的状态）。但是在敲除VEGFa的小鼠皮肤癌模型里，处于增殖的TEC比例大幅度降低。因此VEGF对皮肤CSCs的增殖和自我更新有重要影响。 （三）皮肤癌小鼠模型里过表达Vegfa 在已经建立皮肤癌的小鼠模型里，特异性使TEC内Vegfa基因过表达，来研究VEGF的增加是否增加CSCs的自我更新能力。 Vegfa基因过表达后，可见CSCs大量增殖，对称性细胞分裂的CSC比例增加。 结果表明：VEGF可以通过增加CSC的自我更新，促进血管内皮细胞的增殖和血管密度的增加促进肿瘤的生长。 VEGF改变CSCs的自我更新和分化能力以及其分子机制，我们从基因水平研究获得： 1、regulate stemness:Sox、Hmga 2、 proliferation:Ccnd1、Ccng1 3、通过血管微环境调控肿瘤细胞之 Genes 间的相互作用：Col1、Col3a1 4、鳞状细胞癌中表达的基因： Krt13、Ano1 在Vegfa基因过表达的皮肤癌小鼠模型中，很多基因表达增加，通过qRT-PCR、流式