-饲料中Vb含量的测定.pptVIP

步骤： 1、试液的制备 ????? 根据产品含量，称取试样约0.1g-1g(精确至0.0002g)，置于100 mL棕色容量瓶中，加约60 mL水，在超声波水浴中超声提取15 min，冷却至室温，用水定容至刻度，混匀，过滤，滤液过0.45 μm滤膜，供高效液相色谱仪分析。 饲料添加剂维生素B12的测定 成员组成：孙晓 谭青 巩淇 维生素B12是什么？ 所有呈现氰钴胺素生物活性的类咕啉的总称。是含钴的维生素，胃肠道对其吸收不良将引起恶性贫血。维生素B12的辅酶形式是钴胺酰胺。 维生素B 12的作用？ 1.促进红细胞的发育和成熟，使肌体造血机能处于正常状态，预防恶性贫血；维护神经系统健康2.以辅酶的形式存在，可以增加叶酸的利用率，促进碳水化合物、脂肪和蛋白质的代谢；3.具有活化氨基酸的作用和促进核酸的生物合成，可促进蛋白质的合成，它对婴幼儿的生长发育有重要作用。4.代谢脂肪酸，使脂肪、碳水化合物、蛋白质被身体适当运用；5.消除烦躁不安，集中注意力，增强记忆及平衡感6.是神经系统功能健全不可缺少的维生素，参与神经组织中一种脂蛋白的形成 原理 ????? 饲料试样中维生素B12经水提取后，注入反相色谱柱上，与流动相中离子对试剂形成离子偶化合物，用流动相洗脱分离，外标法计算维生素B12的含量。 2、色谱条件 ????? 固定相：C18柱：内径4.6 mm，长150 mm，粒度5μm。 ????? 流动相：每升水溶液中含300 mL的甲醇(4.1.2)、1 g的己烷磺酸钠(4.1.4)和10 mL的冰乙酸(4.1.3)，过滤，超声脱气。 ????? 流速：0.5 mL/min。 ????? 检测器：紫外可调波长检测器（或二极管矩阵检测器），检测波长361 nm。 ????? 进样量：20 μL。 3、定量测定 ????? 按高效液相色谱仪说明书调整仪器操作参数，向色谱柱中注入维生素B12标准工作液(4.1.7)及试样溶液(4.4.2.1)，得到色谱峰面积响应值，用外标法定量。 4、计算结果 试样中维生素B12 (C63H88 CoN14014P)含量X1以质量分数(%)表示，按以下式计算： X1=（Pi·C·100）/（Pst·m）·10-4 Pi——试液峰面积； ????? c——维生素B12标准工作液浓度，单位为微克每毫(μg/mL)； ?????100——试液稀释倍数； ????? Pst——维生素B12标准工作液峰面积；????? m——试样质量，单位为克(g)。 试样中维生素B12占标示量的质量分数(%)以X2表示，按以下式计算： X=（X/K）·100 K——产品中维生素B12标示量。 ????? 平行测定结果用算术平均值表示，保留三位有效数字。 5、重复性 ????? 同一分析者对同一试样同时两次平行测定结果的相对偏差应不大于5%。 检验规则 ?1、 饲料添加剂维生素B12应由生产企业的质量监督部门按本标准进行检验，本标准规定所有指标为出厂检验项目，生产企业应保证所有维生素B12产品均符合本标准规定的要求。每批产品检验合格后方可出厂。 2、使用单位有权按照本标准规定的检验规则和试验方法对所收到的维生素B12产品进行验收，检验其指标是否符合本标准的要求。 3、采样方法：抽样需备有清洁、干燥、具有密闭性和避光性的样品瓶，瓶上贴有标签并注明：生产厂家、产品名称、批号、取样日期。 ????? 抽样时，用清洁适用的取样工具插入料层深度四分之三处，将所取样品充分混匀，以四分法缩分，每批样品分两份，每份样量应为检验所需试样的3倍量，装入样品瓶中，一瓶供检验用，一瓶密封保存备查。 4、判定规则：若检验结果有一项指标不符合本标准要求时，应加倍抽样进行复验，复验结果仍有一项指标不符合本标准要求时，则整批产品判为不合格品。