SIBIA电泳仪操作程序.doc

Sebia电泳仪简要操作 1．血清蛋白电泳： 血清加样10μL --→保湿5分钟 --→挂缓冲条--→电泳底版加20μ0 L蒸馏水--→吸去胶片表面水分--→放进电泳舱--→放下电极架--→放入加样梳--→关上电泳盖--→选电泳项目--→按确定键--→按开始键--→检查染脱色液--→胶片放入染脱色舱--→选染脱色项目--→按确定键--→按开始键 加样梳： 7人份\15人份－6号位，30人份－3号、9号位，54人份－2号、6号、10号位。 2. 免疫固定 样品稀释: A液－1: 3 血清30μL + 稀释液 60μL， B液－1: 6 血清20μL + 稀释液 100μL 1、2人份加8μl抗血清。4人份加12μl抗血清 加样10μL (1、 8、15号位不加。3、10号位加B液。其余各孔加A液。) --→保湿5分钟--→挂缓冲条电泳底版加200μL蒸馏水--→--→放进电泳舱--→放下电极架--→放入加样梳--→关上电泳盖--→电泳选项目--→按确定键--→按开始键--→取出电极架--→放入定位杆--→放入加样模板--→加抗血清各孔加8μL抗血清，依次为ELP、IgG、IgA、IgM、IgK、IgL）--→关上电泳盖--→按开始键--→打开电泳盖--→按开始键--→移去定位杆、加样模板--→放厚滤纸--→按开始键--→移去厚滤纸--→关上电泳盖--→按开始键 检查染脱色液--→胶片放入染脱色舱--→选染脱色项目--→按确定键--→按开始键 1、2人份加8μl抗血清。4人份加12μl抗血清 加样梳：1、2人份－6号位，4人份－3号、9号位。 3. 本周氏蛋白免疫固定 样本处理：尿标本直接加样； 血清须稀释—— A液：血清10μl + 生理盐水90μl（用于GAM、K、L） B液：血清10μl + 生理盐水20μl（用于KF、LF） 加样10μl（1、8、15号孔不加，用血清时2 – 5及9 - 12号孔加A液、6 – 7及13 - 14号孔加B液）--→保湿5分钟--→挂缓冲条--→电泳底版加200μL蒸馏水--→吸去胶片表面水分--→放进电泳舱--→放下电极架--→放入加样梳--→关上电泳舱盖--→电泳选项目--→按确定键--→按开始键--→打开电泳舱盖--→取出电极架--→放入定位杆--→放入加样模板--→加抗血清（各孔加8μl抗血清，依次为EPL[黄]、GAM[紫]、K[绿]、L[蓝]、 KF[橙]、LF[红]）--→关上电泳舱盖--→按开始键--→打开电泳舱盖--→开始键--→移出定位杆、加样模板--→放厚滤纸—→按开始键--→移去厚滤纸--→关上电泳舱盖--→按开始键 检查脱色液--→胶片放入染脱色舱--→选脱色项目--→按确定键--→按开始键 1、2人份加8μl抗血清。4人份加12μl抗血清 加样梳:（1、2人份：6号位；4人份：3号、9号位） 4. 脑脊液 加样15μL（1、8、15号孔加样品稀释液。2~7、9~14号孔各加脑脊液和血清）--→干燥15分钟--→挂缓冲条--→电泳底版加200μL蒸馏水--→吸去胶片表面水分--→放进电泳舱 --→放下电极架--→放入加样梳--→关上电泳盖--→电泳选项目--→按确定键--→按开始 键--→取出电极架--→放入定位杆--→放入加样模板--→加50μL稀释后的抗血清--→按 开始键--→打开电泳盖--→30°插入滤纸梳、45°吸出抗血清--→按开始键--→移去加样模 板--→放厚滤纸--→按开始键--→移去厚滤纸--→换上水合模板--→加入4mL水合剂--→ 关上电泳盖--→按开始键--→吸出水合剂--→移去加样模板--→放厚滤纸--→按开始键— →移去厚滤纸--→放上水合模板--→加入4mL水合剂--→按开始键--→吸出水合剂--→加 入2 mL TTF3显影液--→按开始键--→吸出显影液--→移去加样模板放厚滤纸--→按开始 键--→移去厚滤纸--→放上水合模板--→加入4mL水合剂--→按开始键--→吸出水合剂— →移去加样模板--→放厚滤纸--→按开始键--→移去厚滤纸--→按开始键-- 加样梳：放8号位。 显影液配制：TTF3溶剂2 Ml + TTF3 50μL + 30%H2O2 2μL 抗血清配制：IgG 60μL + 抗血清稀释液 600μL 注意：CSF 与血清必须取自同一个人并同时抽取。CSF与血清的IgG浓度必须一致且等于 5~10 mg/L 5．尿蛋白电泳（SDS）: 稀释样品（1：5）--→吸去胶片表面水分--→加样5μL --→电泳底版加200μL蒸馏水电 泳底版--→吸去胶片表面水分--→放进电泳舱--→挂缓冲条--→放下电极架--→关上电泳 盖--→电泳选项目--→按确定键--→按开始键检