陈立娜《药用植物学与生药学》第六章生药质量标准的制定与控制.pptVIP

（二）生药质量的定量控制 意义： 选择具生理活性的主要化学成分，作为有效成分或指标性成分； 建立含量测定项目，评价药物的内在质量，并衡量其商品质量是否达到要求及产品是否稳定。 1．以化学成分为对象 生药中化学成分众多，依据生物活性，可分为： 活性成分 非活性成分 有效成分(active constituent) 以化学成分作为质量控制指标时，应该首选有效成分，进行针对性定量； 有效成分尚不清楚，可对总成分如总黄酮、总生物碱、总皂苷进行测定； 有效成分不清楚，质量控制指标应选用“指标成分(mark constituent)”。 2、化学成分的定量分析 色谱条件选择 提取方法的优化 方法学考察 样品含量测定 (1) 检测波长的确定 标准品在325nm处有最大吸收 (2) 色谱条件的选择和优化 色谱条件优化结果 乙腈-水（含0.04%磷酸，2%异丙醇） 乙腈/水（0.04%磷酸,2%的异丙醇） 乙腈/水（2%的异丙醇） 乙腈/水（0.04%磷酸） 色谱程序条件表 A为乙腈，B为水（含0.04%磷酸，2%异丙醇） 药材色谱分离图 标准品色谱分离图 (3) 专属性 分离度大于1.5 空白样品无干扰或峰纯度检测符合要求 (4) 样品提取条件的考察 提取溶剂的考察 不同提取溶剂测得的结果 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 氯 仿 甲 醇 氯仿-甲醇（1:1） 氯仿-甲醇（1:3） 氯仿-甲醇（3:1） 乙 酸 乙 酯 标准品1 标准品2 氯仿-甲醇3:1 样品提取方式的考察 不同提取方式测得的结果 超声 提取30min 线性关系 仪器精密度 考察项目 加样回收率 方法重复性 (5) 方法学考察 检测限和定量限 耐用性 标准曲线的制作 标准品线性范围分别为10.7~171.0 ?g/ml，24.5~490.0?g/ml 精密度实验 精密吸取混合对照品溶液，连续进样6次，计算各色谱峰的保留时间（Rt）和峰面积（Pa）的相对标准偏差(RSD)来考察日内变异。日间变异通过连续进样3天，每天进样6次来测定。 仪器精密度良好 重现性实验 精密称取药材粉末2g（过四号筛），按“样品测定”项制备供试样品并分析，以外标法计算标准品的含量（mg/g），考察测定方法的重现性。 重现性良好 稳定性实验 取同一份供试品溶液，分别于0、2、4、6、8h进样，考察供试品溶液稳定性。 供试品溶液在8h内稳定 回收率实验 采用加样回收法，即于已知被测成分含量的生药中再精密加入一定量的被测定成分纯品，依法测定，用实测值与原样品中含被测成分量之差，除以加入的纯品量计算回收率。回收率要求在95%~105%。 标准品加样回收率实验结果 耐用性实验 系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为使方法用于常规检查提供依据。 改变三种流动相系统 改变不同厂家或不同批号的色谱柱 十批样品含量测定结果 (6) 样品测定 应用所建立的方法，测定药材样品含量，一般6-10批。 (6)含量限度的确定 平均含量下浮20%为依据，制定含量限度。 （三）生药化学成分的指纹图谱 光谱指纹图谱分析 色谱指纹图谱分析 中药指纹图谱系指某种（或某产地）药材或中成药经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的足够标示该中药材或中成药特征的色谱或光谱的图谱。 其特点在于： （1）通过指纹图谱的特征性，能有效地鉴别样品的真伪或产地。 （2）通过指纹图谱的主要特征峰的面积或比例的制定，能有效控制产品的质量，确保产品质量的稳定。 色谱条件的选择 选择参照物 建立指纹图谱 相似度评价 指纹图谱的建立 测定时间的考察 仪器精密度考察 重现性试验 稳定性实验 根据10批次以上样品的检测结果,找出样品共有峰，并以参照物作为参照对图谱中其它峰进行相对保留时间和相对峰面积的计算，建立药材的指纹图谱。 “中药材生产质量管理规范”（GAP）是为保证中药材（或天然药物）的优质安全无公害并且质量具有可控性，而对中药材的产前、产中、产后实施的全程标准化、规范化管理，最大限度的保证药材内在质量的可靠性、稳定性。并由此延伸至中药科研、生产、流通的所有质量领域，为整个中药质量体系打下基础。 第三节 中药材生产质量管理规范（GAP） GAP主要内容 种子及繁殖材料，对种子、种畜进行物种鉴定。 根据植（动）物习性，在适宜环境中进行规范化、标准化栽培（养殖），生产绿色药材。 研究药材体内有效成份的积累规律，确定