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心肌电活动 医学基础实验教学中心 张 犁 一、实验目的 1.学会蟾蜍在体心脏的实验方法; 2.通过心肌收缩性观察,加深心肌电生理特性与收缩性关系的理论知识; (1)通过观察在心脏活动的不同时期给予刺激出现的反应,验证心肌兴奋性的阶段性变化特征。 (2)利用斯氏结扎的方法,观察蛙心起搏点和各部分的自律性活动情况,加深理解心脏的自律性和传导性。 二、理论基础 (一)心肌细胞生理特性 1.兴奋性 2.自动节律性 3.传导性 4.收缩性 二、理论基础 细胞发生兴奋过程中,兴奋性发生周期性变化,是所有神经和肌肉组织共同的特性,但心肌的有效不应期特别长,一直延续到机械反应的舒张期开始之后。 因此,只有到舒张早期之后,兴奋性变化进入相对不应期,才有可能在受到强刺激作用后发生兴奋和收缩。心肌组织的这个特点,使得心肌不会象骨骼肌那样产生完全强直收缩而始终作收缩和舒张相交替的活动。 (二)兴奋性周期性变化与收缩活动的关系 二、理论基础 1.期前收缩 如果心肌在有效不应期之后,下一次正常窦性兴奋到达之前受到一次额外的刺激产生一次期前兴奋,引起的收缩称为期前收缩。 2.代偿间歇 期前兴奋也有自己的不应期,这样,当紧接着的窦性兴奋传到心肌,常常正好落到期前兴奋的有效不应期上,导致心肌收缩“脱失”一次,必须等到再下一次窦性兴奋才能引起收缩。故在一次期前收缩之后往往出现一段较长的心肌舒张期,称为代偿间歇。 二、理论基础 (三)自律性和传导性与收缩活动之间的关系 两栖类动物传导系统组成:静脉窦、窦房沟、房室沟。 其具有自动节律性,其中静脉窦自律性最高,是主要起搏点。窦房沟、房室沟是潜在的起搏点,正常状态下它们只起传导兴奋的作用。 正常心脏活动顺序:静脉窦、心房、心室。 但是当静脉窦起搏点的兴奋不能传到窦房沟、房室沟时,窦房沟、房室沟的兴奋也可引起心脏的搏动。 本实验用斯氏结扎法先后结扎蟾蜍的主要和次位起搏点,观察它们的自动节律性。 三、实验技术路线 (一)实验动物和观察指标 1.实验动物:蟾蜍 2.观察指标: (1)兴奋性周期性变化与收缩活动的关系 1)心脏搏动的基本曲线图。 2)准确辨认收缩相、舒张相、期前收缩、代偿间隙。 (2)自律性和传导性与收缩活动之间的关系 1)辨认蟾蜍心脏结构(静脉窦、窦房沟、房室沟) 2)观察静脉窦、心房和心室收缩的顺序,记录心搏频率。 3)观察窦性心律、房性心律和室性心律,记录心搏频率。 三、实验技术路线 (二)实验基本手术操作 1.取蟾蜍1只,破坏脑和脊髓,将其仰卧固定于蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪掉,然后从剑突向两侧锁骨肩峰端剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏。 三、实验技术路线 (二)实验基本手术操作 2.将与张力换能器有连线的蛙心夹在心室舒张期夹住心尖。 将刺激电极固定,使其两极与心室壁在舒张期与收缩期均能接触。 选择实验项目,调节刺激强度,预设刺激强度为0.5 V。 三、实验技术路线 (三)兴奋性周期性变化与收缩活动的关系实验步骤 1.描记正常蛙心的搏动曲线,分清曲线的收缩相和舒张相。 2.分别在心室收缩期和舒张早期,按下PcLab的“刺激”按钮以刺激心室,观察能否引起期前收缩。 3.在心室舒张早期之后,按下PcLab的“刺激”按钮刺激心室,观察有无期前收缩的出现。 4.刺激如能引起期前收缩,观察其后是否出现代偿间歇。 三、实验技术路线 (四)自律性和传导性与收缩活动之间的关系 1.观察心脏结构,及静脉窦、心房、心室的收缩次序和心率; 2.在窦房沟处做一次结扎,即斯氏第1结扎。待心房、室活动恢复后,记录各部位心率; 3.在房室沟处穿线,并作第2次结扎,即斯氏第2结扎。待心室活动恢复后,记录各部位心率。 斯氏第一结扎 斯氏第二结扎 四、结果记录 (一)期前收缩与代偿间歇 (二)心脏起搏点分析 实验项目 搏动频率(次/min) 静脉窦 心房 心室 正常对照 第一结扎 第二结扎 五、注意事项 (一)破坏蛙的脑和脊髓要完全。 (二)蛙心夹与张力换能器间的连线应有一定的紧张度。 (三)注意滴加任氏液,以保持蛙心适宜的环境。 (四)斯氏结扎部位准确、牢靠。 六、知识拓展 该实验是1852年,Stannius在脊椎动物胚胎管状心不同区域作结扎(在静脉窦与心房之间作第一结扎,在心房与心室之间作第二结扎)实验中证实:心脏的特殊传导系统具有自动节律性,且各部分自律
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