【医学ppt课件】有机磷农药中毒胆碱酯酶测定.ppt

有机磷农药中毒胆碱酯酶测定 公共卫生学院 预防医学系 肖勇梅 实验目的 1.掌握胆碱酯酶测定的意义； 2.熟悉胆碱酯酶的测定方法。 * 胆碱酯酶测定的意义 胆碱酯酶分为真性胆碱酯酶和假性胆碱酯酶。 真性胆碱酯酶：乙酰胆碱酯酶，主要分布在神经细胞和红细胞，对于乙酰胆碱有特殊作用，其主要对神经传导起作用；(有机磷抑制此酶) 假性胆碱酯酶：丁酰胆碱酯酶，主要分布于血清、唾液腺及肝脏，分解丁酰胆碱作用强，也可以分解丙酰胆碱和乙酰胆碱（作用较弱）。 * 全血胆碱酯酶（特异性胆碱酯酶）降低主要见于有机磷农药和神经性化学毒剂中毒。血清胆碱酯酶（非特异性胆碱酯酶）降低见于有机磷农药中毒及肝细胞严重损害。 * 胆碱酯酶测定的意义 血液胆碱酯酶活性检验是有机磷农药中毒早期发现、诊断及治疗的重要指标之一。 * 测定方法 按照2002年发布的职业病职业性急性有机磷杀虫剂中毒诊断标准（GBZ8-2002），胆碱酯酶活性的检验有硫代乙酰胆碱-二硫双硝基苯甲酸法(GBZ52)、便携式胆碱酯酶测定仪法和纸片法等,但是对胆碱酯酶活性测定的方法不作统一规定。 * 按照测定原理分类 测定酶作用产物生成量的方法：主要测定乙酸，采用溴麝香草酚蓝比色法； 测定酶作用后剩余底物的方法：如羟肟酸铁比色法（羟胺三氯化铁法）； 利用特殊底物做测定：如用乙酰硫代胆碱（DTNB法）或乙酰萘做底物的测定方法。 * 按照具体操作可分为： 光电比色法 纸片法 便携式测定仪 * 本次实验操作采用某生物工程公司生产的“血清胆碱酯酶测定试剂盒”测定。 具体的操作步骤按照试剂盒“操作说明书”进行。 酶活性的计算按照“操作说明书”进行 * 注意事项 注意血量、底物浓度、反应温度、保温时间等； 注意个体间胆碱酯酶活性的差异； 由于实际工作中对比较接触毒物前后酶活性的改变不易办到，应采用对照和正常值作参考。 * 实习报告 本次实验的名称、方法、原理 实验测定的结果 实验结果的计算和评价 *