【PPT】-性病的实验室检测及其意义.ppt

梅毒血清学检测原理 当人体感染梅毒螺旋体后4周-10周左右，血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性抗体（反应素）和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。这些抗体均可用免疫学方法进行检测，是辅助诊断梅毒的重要手断. * 梅毒血清学检测 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 性病研究实验室试验 （VDRL） 血浆反应素环状卡片试验 （RPR、TRUST） 梅毒螺旋体抗原血清学试验 梅毒螺旋体血球凝集试验 （TPHA） 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA） 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、 梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（ELSA） 胶体金梅毒快速检测试验 * 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。 非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速，敏感性和特异性较好。适用于梅毒的筛查。 经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。 * 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 存在假阳性反应 ①技术性假阳性反应 由于标本的保存不当（如细胞污染或溶血）、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。 ②生物学假阳性反应 是由于患者有其他疾病、吸毒或生理状态发生变化，使梅毒血清试验出现阳性 * 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 所有的非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本成分都是一样的，包括RPR、TRUST等 基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇 抗原抗体结合形成复合物、凝集成网状沉淀颗粒、肉眼可观察结果 方法敏感性和特异性都基本相似 * 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 未经治疗的病人和部分经过治疗的患者，其血清内的反应素可长期存在。 经正规治疗后，反应素可以逐渐减少，并可转为阴性 早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后3个月，其抗体滴度下降2个稀释度，6个月下降4个稀释度。 一期梅毒1年后绝大部分转为阴性 二期梅毒2年后大部分转为阴性。 晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢，大部分病人血清反应可能终身阳性。 * 非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读 1、性病研究实验室（VDRL）玻片试验 定性试验 a. 血清标本需56℃灭活30分钟备用； b. 吸取0.05mL血清放入玻片圈内，将血清涂开至整个圈内； c. 用标准针头加入1滴VDRL抗原； d. 将玻片置旋转器上摇动4 min，180±5次/min，立即置10×10倍显微镜下观察。 * 非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读 大或中等大小的絮状物，液体清亮: 3+-4+强阳性反应 絮状物较小，液体较清亮: 2+ 阳性反应 絮状物较小，均匀分布，液体混浊 1+ 弱阳性反应 抗原颗粒稍粗，无凝集 ± 可疑 抗原颗粒均匀，针状细小: – 阴性反应 * 非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读 定量试验 a. 在反应板1～8孔各加等渗盐水0.05 mL b. 吸取0.05 mL血清标本（血清已灭活）置第1孔与等渗盐水混匀，吸取0.05 mL稀释液至第2孔混匀，再吸取0.05 mL至第3孔，如此连续稀释至第8孔，弃0.05 mL稀释液。稀释度为原倍、1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128，必要时可稀释至更高倍数 c. 每个稀释度加入抗原1滴 d. 旋转速度和时间同定性试验 * 非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读 2、快速血浆反应素（RPR）环状卡片试验 RPR试验是VDRL试验的一种改良方法。该法是在抗原中加入活性炭颗粒作为指示物，特制的白色纸卡替代了玻片。试验结果易于判断，肉眼即可观察，血清不需灭活，也可用血浆进行检测，试验结果可保存。抗原放4℃冰箱可保存1年。 * 非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读 定性试验 a. 吸取0.05 mL血清或血浆加于卡片圈内，并均匀地涂布在整个圈内（每张纸卡有10个或12个反应圈）； b. 将抗原轻轻摇匀，用标准针头吸取抗原，每个标本加1滴抗原； c. 将卡片置水平旋转器旋转8 min，100±5转/min； d. 立即在明亮光线下观察结果。 * 非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读 中到大的黑色絮状物，液体清亮 3+-4+ 强阳性 小到中的黑色絮状物，液体较清亮 2+ 阳性 小的黑色絮状物，液体混浊 1+ 弱阳性 仅见活性炭颗粒集于中央一点或均匀分散 － 阴性 * 非梅毒螺旋