血液DNA提取.ppt

动物遗传学实验 血液DNA提取及检测 河南农大牧医工程学院 周建设 1.熟练掌握从外周血快速提取基因组DNA的方法； 2.熟悉琼脂糖凝胶电泳的实验过程。 KI 0.9%NaCl 异丙醇或无水乙醇 Eppendorf管 微量加样器等 操作流程 纯化去蛋白 沉淀核酸 洗涤去盐 溶解DNA沉淀 样本裂解 外周血基因组DNA的提取　 1、取抗凝血300μl 2、加无菌重蒸水1000μl；13000r/min离心5分钟; 3、弃上清，加100μl 5mol/L KI，旋涡振荡30秒; 4、0.9%NaCl 300μl,450μl氯仿：异戊醇，充分混匀5min；13000r/min离心5分钟 5、吸上清加等体积的异丙醇或者2倍体积的无水乙醇，轻轻混匀，13000r/min离心5分钟 6、弃上清，加800μl 70%乙醇洗涤，13000r/min离心5min。 7、弃去70%乙醇，离心1分钟，将残液用移液器取出，自然干燥；20μl无菌重蒸水，混匀溶解备用。 取10μl的DNA与DNA Ladder Marker进行琼脂糖凝胶电泳分析，分析结果采用紫外灯照相。