敏感与非厌氧菌.PPT

第十五章厌 氧 菌 第一节 概念、种类与分布 是指一大群在有氧条件下不能生长，必须在无氧条件下才能生长的细菌。主要可分为两大类，一类是有芽胞的G+梭菌，另一类是无芽胞的G+及G-杆菌与球菌。 无芽胞厌氧菌在临床厌氧菌标本检出率中约占90％,分布广泛，多为条件致病菌；厌氧菌的感染遍及临床各科，且多为混合感染；对氨基糖甙类抗生素耐药，而对甲硝唑(灭滴灵)普遍敏感, 40多个菌属，300多个菌种。有芽胞厌氧菌只有梭菌属，共130个种。 无芽胞厌氧菌同需氧菌与兼性厌氧菌共同构成机体的正常菌群,其中厌氧菌占有绝对优势，例如肠道菌群占99．9％。正常情况下菌群之间保持着微生态平衡，厌氧菌代谢产生的乙酸、乳酸等能抑制病原菌生长。如长期使用广谱抗生素、激素、免疫抑制剂等，在发生菌群失调或机体免疫力下降或细菌进人非正常寄居部位时，这些厌氧菌即可作为条件致病菌而导致内源性感染。 (一)厌氧菌感染的条件 1.组织缺氧或氧化还原电势(Eh)降低可造成厌氧菌生长的适宜环境，易于遭受厌氧菌感染。 2.机体免疫功能下降，如老年人、早产儿, 接受免疫抑制剂、抗代谢药物、放射或化疗治疗的患者，其全身免疫功能受损或降低，厌氧菌感染率相当高。 3.长期应用氨基糖甙类抗生素，或长期应用头孢菌素、四环素等无效者，均可诱发厌氧菌感染。 4.需氧菌、兼性厌氧菌的混合感染。需氧菌生长耗竭了氧气，有利于厌氧菌的生长。 (二)厌氧菌感染临床细菌学指征 1.感染局部产生气体，组织肿胀和坏死。 2.粘膜附近的感染。 3.深部外伤的继发感染，流产胃肠手术后发 生的感染。 4.分泌物有恶臭，或为暗血红色，并在紫外 光下发出红色荧光。 5.分泌物涂片镜检有细菌，而常规培养阴性 者；或在培养基深部长的细菌。 6.长期应用氨基糖甙类抗生素治疗无效病例。 第二节厌氧性细菌的检验 (一)采集标本 不能被正常菌群污染；应尽量避免接触空气。最理想是能取得组织标本。 下列标本无送检价值，不宜做厌氧菌培养：①鼻咽拭子；②齿龈拭子；③痰和气管抽取物；④胃和肠道内容物、肛拭；⑤接近皮肤和粘膜的分泌物；⑥褥疮溃疡及粘膜层表面；⑦排出的尿或导尿；⑧阴道或子宫拭子；⑨前列腺分泌物。 标本运送中应尽量避免接触空气。不要冷藏 。 (二)直接涂片·染色镜检 结合标本来源，性状与气味，可提供许多有用的信息,对估计标本中含菌量、细菌种类和选择培养基等都有意义 。标本发臭，镜检发现细菌染色不均，形态奇特者常是厌氧菌的表现 。 如两端钝圆着色深，中间着色浅不均匀，且有空泡，长短不一的革兰阴性杆菌常脆弱类杆菌。 标本呈琥珀酸味，带血性或用紫外灯照射发红色荧光，涂片镜检为G-球杆菌，间或有长短不一的多形性，并有恶臭者，常为产黑色素普雷沃菌。 菌体细长，两端尖, 为梭形的G-杆菌，有紫色颗粒沿菌体长轴排列，成双排列尖端相对，并有丁酸臭味者，常是具核梭杆菌。 菌体高度多形性，长短不一，菌体中部肿胀或呈圆球者，可能是坏死梭杆菌 。 极小的G-球菌，可能是韦荣球菌。 G+无芽胞杆菌，呈乳酸气味者，可能是乳酸杆菌。呈丙酸气味者，并有特殊排列呈X、Y、或栅状者可能是痤疮丙酸杆菌。 有醋酸气味的可能是双歧杆菌。 菌体分枝，呈棒状或栅状排列，且发现黄色颗粒，有琥珀酸气味者，多是放线菌。 G+芽胞杆菌，肯定是梭状芽胞杆菌属。 G+短粗两端钝圆杆菌，无芽胞，中性粒细胞也很少且变形破碎，标本来自战伤或肢体严重肿胀者，大多是产气荚膜梭菌。 G+杆菌，有芽胞，并有异丁酸或异戊酸等气味，标本来自抗生素相关性肠炎者，大多是艰难梭菌。 （三）厌氧菌培养基 1)强化血琼脂平板(BAP)： 即布氏琼脂或牛心、牛脑浸出液琼脂为基础培养基，补加酵母浸膏(0．5％)、动物血(5％～10％)、维生素k1(0.1μg／ml)和氯化血红素(5μg／ml)，是一种非选择性培养基，几乎能培养出所有的厌氧菌。 2)卡那—万古霉素冻溶血琼脂平板(KVLB)： 可抑制大多数兼性厌氧菌，使产黑色素普雷沃菌早期形成黑色素。只需2—3d出现黑色菌落。绝大多数类杆菌属、普雷沃菌属和紫单胞菌属都生长良好，梭杆菌和厌氧球菌不能生长。是常用的选择性培养基。卡那霉素含量为75—100μg／ml，万古霉素为75μg／ml。 3)七叶苷胆汁平板(BBI)：本培养基含20％胆汁，1g／L七叶苷和100μg／ml的庆大霉素。抑制需氧菌，胆汁抑制对之敏感的厌氧菌。只有耐胆汁的脆弱类杆菌与可变梭杆菌和死亡梭杆菌不被抑制，反被刺激菌落较大，还能水解七叶苷，菌落周围有棕黑色的晕。 4)卵黄平板(EYA)和兔血平板：用于选择产气荚膜梭菌，标本接