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培养基适用性检查作业指导书 题 目 培养基适用性检查作业指导书 制定日期 审核日期 批准日期 年 年 年 月 日 月 日 月 日 文件编码 页 数 ZJ 1/2 年 月 日 制 定 人 审 核 人 批 准 人 生效日期 1 目的 规范培养基适用性检查的方法，保证培养基的培养效果。 2 范围 适用于培养基的适用性检查。 3 责任人 QC 负责按照本作业指导书进行培养基的适用性检查，填写相关记录。 4 内容 4.1 准备工作 4.1.1 试剂：商品脱水培养基、对照培养基、0.9%无菌氯化钠、标准菌株、纯化水。 4.1.2 仪器：生物安全柜。 4.2 操作流程 4.2.1 培养基配制方法 使用商品化脱水合成培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配制,如重量/体 积、pH、灭菌条件和操作步 骤等。实验室使用各种基础成分制备培养基时,应按照 配方准确配制, 培养基严格按说明书条件进行灭菌后。培养基灭菌后应立即取出,不 得存放于高压 灭菌器中，并填写培养基（商品脱水培养基）配制记录。 4.2.2 菌液制备 取保存的传代菌种复苏获得工作菌种。取一环工作菌种上的纯菌落溶解至 10ml 0.9%无菌氯化钠中，震荡摇匀，记为 10-1；取 1ml 菌液加至下一管 9ml 0.9%无菌氯 化钠中，震荡摇匀，记为 10-2；同法操作，分别记为 10-3、10-4、10-5（如未得到 需要的稀释级，可加做 1 到 2 管） 。取不大于 100cfu 的稀释级菌液作为培养基适用 性检查的最佳稀释级。 4.2.3 实验操作 修订号： 第 次 修改人： 题 目 培养基适用性检查作业指导书 页 数 2/2 文件编码 取 1ml 最佳稀释级的菌液（接种量≤100cfu）至需做适用性检查的培养基平板， 每一试验菌株平行制备 2 个平板，另取 1 平皿不接种菌作为空白对照，均放于培养 箱中倒置培养,同时用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。 。 4.3 结论 4.3.1 空性对照 为确认试验条件是否符合要求,空白对照试验应无菌生长。 如空白对照有菌生长, 应进行偏差调查。 4.3.2 被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基的菌落数的比值应在 0.5-2 范围 内，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致，则判定被检培养基适用性检查 合格，反之则否。 5 相关文件 5.1 菌种管理制度 6 相关记录 6.1 培养基（商品脱水培养基）配制记录 6.2 菌种使用记录 6.3 培养基适用性检查记录 修订号： 第 次 修改人：  1