微生物纯培养和显微技术 课件.ppt

微生物学;第2章 微生物的纯培养和显微技术;微生物的基本特点：;混合培养物：含有多种微生物的培养物。; 微生物个体微小的特点也决定了显微技术是进行微生物研究的另一项重要技术。; 实际上，正是由于显微技术和培养技术的建立，才使我们得以认识丰富多彩的微生物世界，真正使微生物学研究发展成为一门科学。;第1节 微生物的分离和纯培养;㈠ 微生物培养的常用器具及其灭菌; 高压蒸汽灭菌。有的玻璃器皿也可以采用高温干热灭菌方法。;㈡ 接种; 接种操作：在无菌箱或无菌室内的无菌环境下进行。无菌箱或无菌室的空气在使用前通过紫外灯或化学药剂灭菌。;琼脂;菌落(colony)：; 不同微生物在特定平板培养基上生长，形成的菌落或菌苔一般具有稳定的特征，如形状、颜色等，可以成为对某种微生物进行分类、鉴定的重要依据。;同一种细菌在不同培养平板上形成不同特征菌落;使用固体培养基怎样获得微生物纯培养？ ;1 稀释平板法(pour plate method);2 涂布平板法(Spread plate method); 如果含菌材料稀释得当，在平板表面或内部就可能出现有一个微生物细胞繁殖形成的分散单个菌落纯培养物。;3 平板划线法(streak plate method);划线法与平板法的比较;4 厌氧微生物的分离;稀释摇管培养法 (shake tube method);三 用液体培养基分离纯培养;四 单细胞(孢子)分离;五 选择培养分离; 待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制。;待分离微生物的生长特征明显不同于其它微生物。; 即富集培养条件, 如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等，环境条件的选择可以考虑物理、化学、生物等各个方面的因素。 ; 富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生理条件的不同组合形式，可满足从自然界选择特定微生物的需要。;七 微生物的保藏技术;㈠ 传代保藏;㈡ 冷冻保藏; 缺点：需专门设备，适合专业保藏机构。 ; 将干燥砂粒与细土混合后灭菌制成砂土管。一般将菌种接种斜面，培养后长出大量孢子，洗下制成孢子悬液。加入无菌沙土管中，减压干燥，抽干水份。用石蜡、胶塞封闭管口，置冰箱保存。 ; 与显微镜自身特点???关，另外也取决于显微镜的正确使用及良好的标本制作技术和观察技术，这就是显微技术。;一 显微镜的种类及原理; 现代的普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，称为复式显微镜。;光学显微镜物镜的特性;㈡ 暗视野显微镜;二 显微观察样品的制备;2 悬滴法; 根据染料和方法的不同，细菌染色分为很多种类：;㈢ 革兰氏染色方法;⑴ 用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染。;第3节 显微镜下的微生物 ;1 形态和排列; ① 单球菌：细胞分裂沿一个平面进行，新个体分散而单独存在。如尿素微球菌(Micrococcus ureae); 我们介绍了球菌的六种排列方式， 但是无论对于那种类型的球菌培养物，其排列特点并不能经常保持一致。;金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus);⑵ 杆菌;炭疽芽孢杆菌 (Bacillus anthracis );⑶ 螺旋菌;螺菌 ;⑷ 其它形态;2 放线菌;⑴ 营养菌丝;放线菌孢子丝类型;3 影响细菌形态的因素;4 异常形态;㈡ 古生菌; 古生菌多生活在条件恶劣的极端环境当中(如高温、高盐、高酸等)，在显微镜下古生菌与细菌具有类似的个体形态。;星形细菌 (star-shaped bacteria );㈢ 细菌与古生菌的细胞大小;纳米细菌(nanobacteria)（50nm） 1998年芬兰科学家E. O. Kajander等报道的最小细菌，可以引起尿结石。; 球菌的大小用直径表示；杆菌和螺旋菌的大小用宽度和长度表示。注意：螺旋菌长度不是它真正长度，而是菌体两个端点距离。如果测量螺旋菌真正长度，应按照螺旋直径和回转圈数进行计算。;影响细菌大小的因素;二 真菌;无隔膜菌丝;根据形态和功能来划分;根霉的鉴别特征： 假根、匍匐菌丝、孢子囊。;曲霉的鉴别特征：足细胞、膨大的顶囊。;青霉鉴别特征：扫帚状分生孢子梗。;㈡ 酵母菌;㈠ 细菌;㈡ 放线菌;㈢ 霉菌; 与细菌菌落类似，但一般较细菌菌落大且厚，表面湿润，粘稠，易被挑起，多为乳白色，少数呈红色。;Many Thanks