生殖免疫学检查方法 课件.ppt

2. 以活动精子检测体液标本中精子抗体的方法：如凝集试验、精子制动试验等 以活精子作为抗原载体，有助于排除精子内部成分的干扰 精浆中的精子抗体主要以与精子结合的形式存在，因此本法主要用于检测血清标本 血清中的精子抗体难以直接作用于精子表面，并干扰生殖，其临床意义尚难以确定 3. 活精子表面附着抗体的检测：如免疫珠试验和混合抗球蛋白反应试验 用抗人免疫球蛋白抗体包被的聚丙烯酰胺微球能结合于结合了精子抗体的精子表面，在相差显微镜或电子显微镜下可见到此种免疫珠随精子向前进而移动。 判断标准为表面有免疫求蛋白的精子在总活动精子中所占的比例 按照世界卫生组织人类不育的病因诊断分来，诊断免疫因素不育的唯一依据为活动精子表面附着免疫求蛋白。相应技术为免疫珠试验和混合抗球蛋白反应试验 干扰精子穿过宫颈黏液、透明带及卵细胞膜，使受孕率降低 抗精抗体 免疫性不孕 抗精抗体 自然流产 抗精抗体与流产 尚无定论 有报道：引起自然流产的抗精抗体主要是女方血清中的抗精抗体 其机理可能为ASA作用于滋养层细胞，从而影响胚胎的生长发育，导致流产 封闭抗体的检测 母胎免疫耐受的机制之一：封闭抗体 胚胎所携带的夫源性 HLA抗原（滋养细胞表面）能刺激母体免疫系统，并产生一类IgG型抗体，称之为封闭抗体。 封闭抗体一方面可与母体淋巴细胞表面抗原结合，也可与滋养细胞本身结合从而阻断母胎之间的免疫识别和反应 习惯性流产患者常缺乏封闭抗体，使母体免疫系统容易对胎儿产生免疫攻击，导致流产 以此为依据，对缺乏保护性抗体的患者采用异体免疫治疗，封闭抗体转为阳性后再妊娠，成功率显著提高 目前国际上许多医疗中心把封闭抗体的测定作为复发性自然流产免疫治疗的指征之一，并用于判定疗效 封闭抗体检测方法 补体依赖性细胞毒实验 单向混合淋巴细胞反应 流式细胞仪检测抗丈夫淋巴细胞抗体 补体依赖性细胞毒试验 基本原理：女方血清内存在的封闭抗体与男方外周血淋巴细胞结合，并在补体介导作用下致细胞细胞死亡，经胎盘蓝或伊红染色，在相差显微镜下读取死细胞数及计算细胞毒指数，细胞毒指数﹥20%为阳性。 少见原因引起的颅内静脉窦血栓形成课件突发心跳呼吸骤停抢救应急演练课件小学英语教学法英语教学原则阻滞剂在减低非心脏手术 生殖免疫学检查方法 中山大学第二附属医院妇产科 刘玉昆 复发性自然流产病因复杂，包括解剖、内分泌、遗传、感染等因素，但仍有50%以上的患者病因不明 大部分原因不明的复发性自然流产患者与免疫因素有关，包括自身免疫和同种免疫 常用的生殖免疫学检查方法 基本原理 在复发性自然流产诊治中的价值和地位 抗磷脂抗体 抗磷脂抗体属一类针对各种带负电荷磷脂的自身抗体，临床上常与复发性动静脉血栓形成、复发性自然流产、血小板减少症等密切相关 磷脂抗体的靶抗原实际上是磷脂/磷脂结合蛋白复合物 能形成此复合物的磷脂有：磷脂酰丝氨酸、心磷脂、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、磷脂酰酸、磷脂酰胆碱等，因此形成相应的多种磷脂抗体 抗心磷脂抗体和狼疮抗凝因子 抗磷脂抗体是一种强烈的凝血活性物质，激活血小板，促进凝血，导致血小板聚集，血栓形成 同时可直接造成血管内皮细胞损伤，加剧血栓形成，使胎盘循环发生栓塞，胎盘梗死，导致流产 直接影响绒毛滋养细胞的生长、分化与侵入 抗磷脂抗体与复发性自然流产关系密切 曾经有过自然流产史并且ACA高水平者，RSA发生率达70%，曾经自然流产≥3次，ACA阳性者，再次自然流产机率可达90% RSA患者APA阳性发生率15-20%，而无自然流产者阳性率为2-5%，且其中ACA阳性者大部分为低度阳性 Harris等调查1000名非选择性产科病人，结果2%患者ACA IgG阳性，4% IgM阳性，其中80%是弱阳性，只有0.2%的IgG和0.7%的IgM为中、重度阳性 狼疮抗凝因子（LA） 1952年， Conley和 Hartmam发现两位因凝血酶原时间和全血凝块时间延长而有出血性疾病的SLE患者中存在一种“抗凝物”，1972年正式命名其为LA 是抗磷脂抗体的一种 LA的实验室检查 在体外实验中，LA能通过与磷脂表面结合而阻断钙依赖性的凝血酶原酶复合物的形成，从而使APTT延长。 筛查实验： 活化部分凝血活酶时间（APTT） 进一步确证实验 在患者血浆中加入正常血浆， APTT延长不能得到纠正 在血浆中加入过量磷脂，APTT可以得到纠正 某些药物也可导致的LA生成，如hydralazine ,chlorpromazine, procainamide 药物导致的LA在停药后可逐渐消除 应用抗凝剂时会影响LA的测定结果 注 意 抗心磷脂抗体（ACA） 抗心磷脂抗体的检测方法目前最常用的为酶联免疫吸附法（ELISA） 原理：酶标板经牛心磷脂包被，以