硕士研究生开题报告2 课件.ppt

硕 士 研 究 生 开题报告;人鼻咽癌细胞系CNE-2Z内存有肿瘤干细胞的证据及其特异性标志物的鉴定;立题依据;;干细胞 一类具有自我更新能力和多向分化潜能的早期未分化细胞，存在于正常组织中,可分为胚胎干细胞和成体干细胞 ;胚胎干细胞 来自于胚胎发育桑葚期的内细胞团，可以分化成各种人体细胞、组织和器官。;成体干细胞 持续停留在某种组织内，具有自我更新能力，能够分化产生本系统内所有类型成熟细胞，并具有可塑性。;;; ;1.都具有自我更新和无限增殖的能力，区别在于：干细胞更新增殖具有自稳定性，而瘤细胞则无；;2.一些相似的信号通路参与干细胞和肿瘤细胞的自我更新，如Wnt、 Notch和Sonic hedgehog(shh)信号转导系统；;3.都具有很高的端粒酶活性 ；;4.形态学上都比较幼稚，胞核大，胞浆少，可见核分裂相，不同的是：瘤细胞多为病理性核分裂相，而干细胞则是正常的核分裂相； ;干细胞、肿瘤干细胞、肿瘤细胞三者之间的联系;正常干细胞的增殖与分化 ;;三者间的关系;;肿瘤很可能是干细胞在长期的自我更新过程中由于多基因突变导致干细胞生长失去调控，而停止在分化的某一阶段无限增殖所形成的异常的组织或器官。 ;肿瘤组织中存在着一类具有干细胞性质的细胞，具有自我更新、无限增殖分化和转移成瘤能力，我们称之为肿瘤干细胞。;肿瘤是一种干细胞疾病; ;因此，在鼻咽癌细胞系CNE-2Z内也存在着肿瘤干细胞。;CD44、P53、EGFR、β-catenin、 Survivin、E－cadherin 鼻咽癌干细胞生物学标志物？;实验目的; 1.检测人鼻咽癌、淋巴结转移性鼻咽癌组织及鼻咽炎组织内CD44、P53、EGFR、β-catenin、Survivin、E-cadherin基因及蛋白表达水平。 ;2.在鼻咽癌细胞系CNE-2Z中分离表达与干细胞生长及鼻咽癌转移密切相关的生物学标记物（CD44、P53、EGFR、β-catenin、Survivin、E-cadherin）的癌细胞并计数，观察其在裸鼠体内的成瘤率。 ;3.结合不同标记物的鼻咽癌细胞成瘤的细胞数，分离联合标记的鼻咽癌细胞，观察其在裸鼠体内的成瘤率，确定比较可靠的鼻咽癌内干细胞表面生物学标记物；;;人鼻咽癌活检组织、淋巴结转移性鼻咽癌组织及鼻咽炎组织;人鼻咽癌细胞系CNE-2Z;主要实验方法 ISH﹑IHC﹑ - 检测人鼻咽炎及鼻咽癌组织CD44、P53、EGFR、β-catenin、Survivin E-cadherin蛋白表达及mRNA的分布;主要实验方法 RT-PCR、Western-bot、IHC -检测鼻咽癌细胞系CNE-2Z内CD44、P53、EGFR、β-catenin、Survivin、E-cadherin基因及蛋白表达水平;主要实验方法;预期结果;1.鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞系CNE-2Z内高表达CD44、P53、EGFR、β-catenin、Survivin、而E-cadherin为低表达；与鼻咽炎组织对比有显著性差异。 ;2.不同标记的癌细胞在裸鼠体内成瘤率不同，有的没有成瘤能力。 ;;4.分离出来的癌细胞应该具备自我更新和分化成不同阶段癌细胞的能力，经培养后形成异质性细胞群体。 ;经费预算;编号 ;时间安排;敬请各位老师批评指正！